如何將 TLC 條件
成功轉化到 Flash 色譜上
色譜應用
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在進行全面的 Flash 色譜之前，化學家通常會進行薄層色譜(TLC)篩選。除了節省時間、溶劑和樣品外，用戶還可以使用他們的 TLC 數據為接下來的 Flash 色譜運行找到更合適的參數。這篇文章強調了 TLC 結果如何轉化為優化分離的理論，并展示了軟件如何將 TLC 數據轉化為更好的純化條件。
假如平時愛好騎平衡車的你突然某一天想去嘗試自己從未涉獵的自行車時，并且很輕而易舉的就掌握了騎自行車的技巧，請你不要驚訝。這是因為你設法將平衡技能從簡單的無踏板自行車轉移到復雜的自行車上。
有趣的是，我們實驗室里的科學家也有類似的功能。我們通常從更簡單的實驗和方法開始，這些實驗和方法需要更少的資源，然后再轉移我們的知識并嘗試更復雜的技術。以薄層色譜（TLC）和 Flash 色譜為例。由于簡單、快速和樣品使用量少，許多 Flash 用戶更喜歡在純化前對樣品進行 TLC 篩選。就像從平衡車到腳踏自行車一樣，人們可以使用從 TLC 實驗中獲得的信息進行更具挑戰性的Flash色譜分析。
如何在自動化 Flash 色譜儀將 TLC 上的結果轉化成為有用的方法？
首先我們需要理解從 TLC 色譜上獲得的數據與待分離 Flash 色譜柱體積（CV）之間的關系。一個典型的 TLC 色譜分析如下：
▲ TLC 色譜示例，其中(a)表示溶劑前沿移動的距離，(b)表示分析物移動的距離
跑完 TLC 薄層色譜之后，需要計算每個分析物的保留因子（Rf），這個可以用一個簡單的公式表示：
保留因子（Rf）=分析物到原點的距離（b）/溶劑前沿到原點的距離（a）
其中：
Rf =1 表示在 TLC 上沒有保留(隨著溶劑前移)，
Rf =0 表示對溶劑沒有親和力(停留在起跑線上)。
使用薄層色譜開發的方法可轉移到 Flash 色譜，因為保留系數和柱體積之間的關系如下:
在實際應用中，保留系數與柱體積的反比關系如下:
最佳 Rf 值范圍為 0.15 ~ 0.35,CV 值范圍為 2.8 ~ 6.7。
較小的 Rf 值導致很長的運行時間和高溶劑消耗，而較大的 Rf 值導致較短的運行時間，并有未全部分離的風險，如下圖所示。
▲ 不同 Rf 和 CV 值下的 TLC 色譜和 Flash 色譜儀示例。(a)較小的 CV 值導致較短的運行時間，這可能導致分離度不夠。(b) CV 范圍在 2.8 和 6.7 之間的結果是分辨率和運行時間以及溶劑消耗之間的最佳平衡。(c)較大的 CV 值導致運行時間長，溶劑消耗高。
這些理論考慮可以很容易地應用于特定的方法開發軟件，例如 Navigator。該程序可以將 TLC 數據轉換為優化的 Flash 方法，以獲得最佳的分離和純化。
用戶只需要幾個簡單的步驟將他們的 TLC 結果轉移到軟件中，并為他們的 Flash 色譜過程確定最合適的參數。
首先，將 TLC 保留因子數據和色譜柱信息輸入軟件中，輸入使用的溶劑和 Rf 值，然后選擇色譜柱類型和相應的流速。
其次，單擊“計算"按鈕并接受，系統自動將分離參數呈現在待操作界面。
最后，根據轉化條件進行實驗并得到想要結果。
需要注意的是，在 TLC 板上使用不同的硅膠與在所選色譜柱上使用不同的硅膠可能會由于硅膠的選擇性不同而產生不同的結果。
理想情況下，TLC 板和色譜柱應選擇相同類型的 Silica。
考慮到這些注意事項和軟件應用，輕松傳輸 TLC 數據將幫助您獲得目標化合物的最佳分離效果。
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