從貓爪草提取物中
分離紫外吸收與非紫外吸收成分
Pure 應用
”
貓爪草是一種熱帶藤本植物，是科學研究的一種寶貴的藥物資源。活性成分為生物堿，丹丁酸和其它可能有促進免疫系統功能潛力的植物素。其中，生物堿有降壓藥的效果，可降低膽固醇，除此之外，還具有消炎、抗氧化和抗癌等特性。
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方法
萃取條件 | ||
萃取類型 | 研磨 | |
重量 | 2g | |
萃取溶劑 | 乙醚 | |
溶劑體積 | 20ml | |
超聲波提取 | 30min | |
Flash 色譜條件 | ||
FlashPure EcoFlex 12g Sclia | ||
流速 | 25ml/min | |
UV1 波長 | 254nm | |
UV2 波長 | 280nm | |
溶劑 A | 正己烷 | |
溶劑 B | 乙酸乙酯 | |
進樣模式 | 液體 | |
ELSD 載體 | 空氣 | |
柱平衡時間 | 5min | |
洗脫方法 | ||||
步驟 | 1 | 2 | 3 | 4 |
時間（min） | 0.0 | 3.0 | 3.0 | 4.0 |
%B | 30 | 30 | 100 | 100 |
▲ 圖 1. 在裝有 12g Sclia 填料的 FlashPure EcoFlex 柱上對貓爪草進行純化。色譜圖說明使用紫外檢測器和蒸發光散射檢測器檢測峰的諸多優點。
通過調整流動相的梯度對方法進行優化以期獲得更好的分離效果，方法如下：
洗脫方法 | ||||
步驟 | 1 | 2 | 3 | 4 |
時間（min） | 0.0 | 3.0 | 9.0 | 1.0 |
%B | 30 | 30 | 100 | 100 |
▲ 圖 2. 優化后的方法使得整體分離度大大提高，在 ELSD 檢測器的加持下，可以有效檢測到無紫外吸收的目標產物。
使用分析型 HPLC 將兩組實驗與初始粗提物進行分析對照，結果如下：
▲ 圖 3. 通過對照發現只用 UV 檢測器對樣品進行純化，不能檢測非發色團的產物，導致餾分純度不高。使用 ELSD 檢測器收集的餾分可分離出高回收率和高純度的組分。
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結論
天然產物在新藥物研發中發揮重要的作用。粗提物通常含有活性良好的先導化合物，因此分離和純化時需要很多步驟且充滿未知性。Pure 系統收集包括 UV 檢測器和 ELSD 檢測器在內的多個檢測器的信號，克服了使用傳統 Flash 色譜方法遇到的純化瓶頸，大大提高目標產物的純度和回收率。化學家可以在雙檢測器以及 Navigator 技術的幫助下，有效地從粗提取物中分離目標化合物和含量低的成分，節省時間和人力成本。
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參考
Cat's Claw; Technical Literature, Raintree Nutrition, Carson City, Nevada.
Medicinal natural products; a biosynthetic approach, 3rd edition; Dewick, P.; John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, New Jersey, 2009.
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