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產(chǎn)品簡介
ReadyPrep 試劑盒所需的樣品量較少（Z多2ml），不需要額外的設(shè)備；因而是一種既節(jié)省時間，又節(jié)省投資的好方法。
詳細(xì)介紹
ReadyPrep 產(chǎn)品線包含一系列2-D 樣品制備試劑盒，不僅適用于通用樣品（總蛋白）處理，而且可以將復(fù)雜樣品按特定方法分級。
處理通用樣品的試劑盒包括總蛋白抽提和蛋白凈化（clean- up）。
樣品分級試劑盒可用來降低樣品復(fù)雜程度，同時有助于低豐度蛋白的富集和鑒定。這類試劑盒又分為兩種，一種是基于蛋白不同的亞細(xì)胞定位來分離，另一 種是對細(xì)胞總蛋白進(jìn)行分級，從而適和于總蛋白質(zhì)組分析。下面的流程圖將幫您確定哪種試劑盒對您更適合。
具體用途
ReadyPrep 2-D 凈化試劑盒
ReadyPrep 2-D 凈化試劑盒可去除蛋白樣品中的去垢劑、鹽分、小肽、之類和酚類化合物。這些物質(zhì)會干擾雙向電泳。本試劑盒含有不受去垢劑、離液劑或其它實(shí)驗(yàn)中常用試劑干擾的沉淀試劑，可充分沉淀樣品蛋白，并保證了蛋白樣品的回收效率和濃度。
ReadyPrep還原/烷化試劑盒
ReadyPrep還原/烷化試劑盒首先將半胱氨酸殘基之間的二硫鍵還原，然后將還原出來的巰基烷化，使得這些基團(tuán)*保持還原狀態(tài)。這樣做有助于 防止假蛋白點(diǎn)的出現(xiàn)并能讓IPG膠條中更多的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到第二向的SDS-PAGE膠中（Candiano et al. 2002） 。本試劑盒對分析堿性蛋白質(zhì)特別有效。因?yàn)槟z條堿性部位的DTT容易電離，在電場作用下遷移出IPG膠條，從而使膠條中DTT減少，蛋白質(zhì)二硫鍵重新形成 （Herbert et al. 1998） 。絕大多數(shù)生物含有較多數(shù)量的堿性蛋白，這類蛋白的pI值高于pH 7 （Wildgruber et al. 2000）。
ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒 （總蛋白）
ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒 （總蛋白） 是一種操作簡單、快捷、重復(fù)性好的試劑盒，用來抽提適合于雙向電泳的細(xì)胞全蛋白。試劑盒中離液性*的抽提溶液含有兼性去垢劑ASB-14，從而使該溶液能溶解各種細(xì)胞的全蛋白。
ReadyPrep蛋白抽提試劑盒 （膜I）
本試劑盒是利用Triton X-114在一定溫度下可與水相分層的原理將蛋白分離 （Bordier 1981, Santoni et al. 2000）。經(jīng)過zui后一步的離心步驟，溶液被分級成上層的水相和下層的高去垢劑相。此外還有一些難溶的沉淀，這些沉淀主要是更加復(fù)雜的膜蛋白。進(jìn)入上下兩 相的蛋白再用ReadyPrep 2-D 凈化試劑盒（含在本試劑盒中）凈化，以去除抽提過程中混入的可能干擾IEF的物質(zhì)。
ReadyPrep蛋白抽提試劑盒 （膜II）
膜II試劑盒做為其它膜蛋白分離試劑盒的補(bǔ)充，是專門為有效分離較為復(fù)雜的膜蛋白而優(yōu)化的。抽提的過程用到了碳酸鈉和超速離心機(jī)。試劑盒中的2-D水化/上樣緩沖液含有強(qiáng)離液性的兼性去垢劑ASB-14。
ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒（信號）
絕大多數(shù)細(xì)胞的胞漿膜都有富含神經(jīng)鞘磷脂和膽固醇的微區(qū)域（酯筏）。與這些脂筏相的蛋白往往是參與物質(zhì)跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)或信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的蛋白質(zhì)。這類蛋白包 括GPI錨訂蛋白、caveolin、caveolae （caveolin-associated proteins）、?；野彼峒っ?、G蛋白異三聚體，以及一些含跨膜結(jié)構(gòu)域的蛋白 （Simons and Ikonen 1997, Brown and Rose 1992, Parton and Simons 1995, Anderson et al. 1992） 。與胞膜當(dāng)中這些富含酯類的微區(qū)域相結(jié)合的蛋白質(zhì)在4°C Triton X-100的溶液中難溶。ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒（信號） 利用這一原理將信號蛋白有選擇性地加以回收。
ReadyPrep蛋白抽提試劑盒（胞漿/核）
ReadyPrep蛋白抽提試劑盒（胞漿/核）使用一種專門配制的緩沖液和差速離心將細(xì)胞核完整地分離出來（Dignam et al. 1983, Zerivitz and Akusjarvi 1989）。本試劑盒包含一種強(qiáng)離液性的緩沖液，可有效溶解膜蛋白，并可直接用于雙向電泳分離。如要對胞漿組分進(jìn)行分析可以將蛋白樣品先用試劑盒中帶的 ReadyPrep 2-D 凈化試劑盒處理。
ReadyPrep 順序抽提試劑盒
ReadyPrep 順序抽提試劑盒是為全蛋白質(zhì)組分析而設(shè)計的。本試劑盒將初始蛋白樣品根據(jù)溶解性的不同分成三個組分。當(dāng)?shù)鞍椎膩喖?xì)胞定位不能確定時，本試劑盒還可以用來搜 尋特定的蛋白。 依照溶液溶蛋白能力的增加將蛋白樣品進(jìn)行順序抽提可以溶解更多的蛋白，從而使蛋白質(zhì)組的信息更全面 （Molloy et al. 1998）。
ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒 （可溶/不可溶）
ReadyPrep 蛋白抽提試劑盒 （可溶/不可溶） 可將細(xì)胞全部蛋白分為兩個組分——以親水性蛋白為主的可溶性組分和以疏水性蛋白為主的不可溶組分。這種簡單的分級方法可有效降低樣品的復(fù)雜性，提高低豐度蛋白的檢測效率，從而在總體上改善總蛋白質(zhì)組的分離效果。
試劑盒中部分試劑介紹
ReadyPrep 順序抽提試劑盒reagent 3—該預(yù)混的樣品緩沖液含硫脲和去垢劑SB3-10，可提高難溶蛋白質(zhì)的溶解效果。使用前加入TBP或DTT可溶解極難溶的蛋白。更多信息請參考資料＃2495。
ReadyPrep 雙向電泳啟動試劑盒水化/樣品緩沖液—該標(biāo)準(zhǔn)配方適合許多蛋白樣品；經(jīng)性能測試的緩沖液能方便地用于制備樣品。
ReadyPrep 雙向電泳啟動試劑盒平衡緩沖液I—緩沖液預(yù)混有DTT，用于DTT/ 碘乙酰胺烷化方法的*個平衡步驟。
ReadyPrep 雙向電泳啟動試劑盒平衡緩沖液II—在緩沖液中加入碘乙酰胺，用于DTT/ 碘乙酰胺烷化方法的第二個平衡步驟。加入TBP 和丙烯酰胺也可用于單步TBP/ 丙烯酰胺烷化方法。
E. coli 蛋白樣品—該蛋白樣品經(jīng)性能測試，與ReadyPrep 雙向電泳啟動試劑盒的水化/樣品緩沖液配合使用時，能提供穩(wěn)定的電泳圖譜。在使用更復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)樣品前，可以用這個樣品作為對照來驗(yàn)證你的雙向電泳系統(tǒng)和實(shí)驗(yàn)操作。
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