化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
蛋白電泳：如何跑出漂亮的條帶 二
閱讀：1245 發(fā)布時(shí)間：2015-7-6
之前我們就電泳過(guò)程中出現(xiàn)的涂抹痕跡展開了解釋，今天主要討論 SDS-PAGE 實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)條紋拖尾的原因進(jìn)行分析。可點(diǎn)擊閱讀原文查看前天推送的內(nèi)容。
這個(gè)不是非常嚴(yán)重，有條紋拖尾的泳道（圖中左邊第 5 道）也是可以用的。條紋的出現(xiàn)是由于一部分膜組分中的高濃度蛋白在跑積層膠過(guò)程中析出然后在很短的時(shí)間里又回到溶液中。由于分離膠表面存在輕度的缺陷（可能是在倒積層膠之前分離膠干了一些），造成整個(gè)泳道的蛋白濃度的不一致，使得出現(xiàn)這種條紋拖尾癥狀，而不是一致的很深的背景。
第 4 道也是由于上述原因而出現(xiàn)條紋拖尾。電場(chǎng)受到了第4道非均一濃度的影響而出現(xiàn)了條帶的縮窄。注意凝膠前端染料的缺失，是由于電泳時(shí)間過(guò)長(zhǎng)所致。
這塊膠就非常難看了。原因在于分離膠倒完之后沒有用水或者異丙醇?jí)耗z，導(dǎo)致分離叫上緣非常粗燥，就像你看到的一樣。當(dāng)樣品堆積在凹凸不平的分界線時(shí)，位于凹陷部位的蛋白由于不能適當(dāng)?shù)臐饪s就析出來(lái)了。然后再跑膠過(guò)程中逐漸溶解造成了條紋拖尾癥狀。