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產品介紹
一、羊產氣莢膜梭菌α毒素抗體檢測試劑盒
通用名：羊產氣莢膜梭菌α毒素抗體試劑盒（酶聯免疫法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Alpha-Toxin gene of Clostridium Perfringens（ELISA）
二、包裝規格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
三、預期用途
羊產氣莢膜梭菌病是由產氣莢膜梭菌（Clostridium Perfringens）引起的，該菌是動物生存環境中常見的一種梭菌, 它能分解有機質中的糖, 并產生大量氣體和毒素, 導致動物機體組織壞死、中毒甚至死亡。感染羊后可引起羔羊痢疾、羊猝疽、腸毒血癥等疾病，嚴重危害養羊業的發展。
羊產氣莢膜梭菌α毒素抗體檢測試劑盒用于檢測羊血清中產氣莢膜梭菌α毒素抗體，可用于羊三聯四防疫苗免疫效果評價。
四、試劑盒原理
試劑盒由預包被產氣莢膜梭菌α毒素蛋白抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成，應用酶聯免疫法（ELISA）原理檢測羊血清、血漿樣本中α毒素抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本，經溫育后若樣品中含有α毒素抗體，則將與酶標板上抗原結合，經洗滌除去未結合的其他成分后；再加入酶標記物，與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合；再經洗滌除去未結合的酶標記物，在孔中加TMB底物液，與酶標結合物反應形成藍色產物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關；加入終止液終止反應后，產物變為黃色；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有產氣莢膜梭菌α毒素抗體。
五、試劑盒組成
酶標板、酶標記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B、陽性對照、陰性對照、終止液、稀釋板、蓋板膜
六、儲存及有效期
于2～8℃避光保存，有效期為12個月。
包被板開封后請于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個月。
【樣品準備】
1.取動物全血按常規方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按50倍稀釋（如4μl血清加入196μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液)。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條，設陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
注：樣本稀釋比例相當于1:50。
4.混勻，蓋好蓋板膜,置37℃（推薦水浴）避光反應30分鐘。
5.甩去孔內液體，每孔加350μl工作洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，最后一次拍干。
6.每孔加酶標記物100μl，蓋好蓋板膜，置37℃避光反應30分鐘。
7.洗滌，同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，蓋好蓋板膜，37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl，混勻，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。
【參考值】 實驗正常的情況下，陰性對照的平均OD值即ODNC應≤0.3，陽性對照的平均OD值即ODPC應≥0.6。
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