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孔雀石綠，分子式為C23H25ClN2，是人工合成的有機(jī)化合物，是一種有毒的三苯甲烷類化學(xué)物，既是染料，也是殺真菌、殺細(xì)菌、殺寄生蟲的藥物，長期超量使用可致癌，無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域國家明令禁止添加。 2019年12月27日，孔雀石綠被列入食品動(dòng)物中禁止使用的藥品及其他化合物清單。
孔雀石綠進(jìn)入水生動(dòng)物體內(nèi)后，會(huì)快速代謝成脂溶性的無色孔雀石綠。孔雀石綠具有潛在的致癌、致畸、致突變的作用，其在養(yǎng)殖業(yè)中的使用未得到美國食品與藥物管理局（FDA ）的認(rèn)可；根據(jù)歐盟法案2002/675/EC的規(guī)定，動(dòng)物源性食品中孔雀石綠和無色孔雀石綠殘留總量限制為2μg/kg；日本的肯定列表也明確規(guī)定在進(jìn)口水產(chǎn)品中不得檢出孔雀石綠殘留；我國在農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《NY5071- 2002無公害食品魚藥使用準(zhǔn)則》中也將孔雀石綠列為禁用藥物。由于沒有低廉有效的替代品，孔雀石綠在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的使用屢禁不止。
深圳艾瑞斯生產(chǎn)的孔雀石綠膠體金快速檢測卡應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成，用于檢測水產(chǎn)品組織樣本中孔雀石綠殘留。樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后，樣本溶液中的孔雀石綠與金標(biāo)抗體相結(jié)合，從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上孔雀石綠偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的孔雀石綠含量大于檢測限時(shí)，檢測線T不顯色或顯色明顯比C線淺，結(jié)果為陽性；當(dāng)樣本溶液中孔雀石綠含量小于檢測限時(shí)檢測線T顯紫紅色（T線與C線一致或更深），結(jié)果為陰性。
樣本前處理：
1、取切碎的一定量的去脂肪水產(chǎn)品組織樣品，用均質(zhì)機(jī)均質(zhì)；
2、取約4 g 均質(zhì)物于50 mL 離心管中；
3、依次加入0.5 mL提取劑1和1 mL提取劑2，再加入4 mL乙腈，擰緊管蓋劇烈振蕩混勻2分鐘；
4、室溫下（20-25℃） 4000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5 分鐘；
5、吸取1 mL 上清液于10 mL離心管中，加入100 μl氧化劑，60℃下氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑霉腆w殘?jiān)?/span>
6、向吹干的離心管中加入0.3 mL MG復(fù)溶液，用吸管反復(fù)吸打管內(nèi)液體以沖洗及溶解管壁上的待測物質(zhì)，作為待檢樣品溶液。
樣品檢測：
1、撕開鋁箔袋，取出檢測卡，水平放置桌面上；
2、用滴管吸取待檢樣品溶液，垂直滴加4滴（約120 μL）到金標(biāo)微孔中，再用滴管將微孔中的紅色物質(zhì)和待檢溶液充分混勻，靜置2 min，吸取全部液體滴加到檢測卡的加樣孔中（S處）；
3、加樣后開始計(jì)時(shí)，室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果，超過10分鐘的結(jié)果只能作為參考。
結(jié)果判斷：
陰性：對(duì)照線（C）出現(xiàn)紫紅色線，檢測線（T）顯色比C線深或者一樣深，說明樣品中待檢物質(zhì)濃度低于檢測限或無待檢物殘留。
陽性：對(duì)照線（C）出現(xiàn)紫紅色線，檢測線（T）不顯色或T線顯色明顯比C線淺，說明樣品中待測物濃度高于檢測限。T線明顯顯示為綠色的，可判為陽性。
失效：在檢測窗內(nèi)，對(duì)照線（C）不出現(xiàn)紫紅色線。
注意事項(xiàng)：
1 、過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品，均不可使用。
2 、檢測卡從冰箱中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開，打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
3 、不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
4 、取液滴管不可混用，以免交叉污染。
5 、待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細(xì)菌污染，否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異常現(xiàn)象，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。
