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貨物所在地:廣東廣州市
所在地: 廣州市天河區(qū)
更新時(shí)間:2025-03-23 21:00:07
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大鼠CD40配體 (ELISA)試劑盒
Elisa 生物檢測(cè)是一種實(shí)驗(yàn)性診斷方法,具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)。 因其試劑穩(wěn)定、易于儲(chǔ)存、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判斷客觀等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)檢測(cè)的各個(gè)領(lǐng)域。 ELISA檢測(cè)試劑盒適用于人血清或血漿中抗人戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)的體外定性檢測(cè)。
中文名稱(chēng)ELISA試劑盒
外文名ELISA試劑盒
發(fā)表于 60 年代和 70 年代
特點(diǎn):試劑穩(wěn)定、易儲(chǔ)存、易操作。
操作方法
雙抗體夾心法
1. 包被:以 0.05 MPH 稀釋抗體至蛋白質(zhì)含量為 1-10 μg/ml。 9.含氧碳酸鹽涂層緩沖液。在 4°C 下將 0.1 ml 添加到每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中過(guò)夜。次日,棄孔中溶液,用洗滌緩沖液洗滌3次,每次3分鐘。 (以下也稱(chēng)為清掃)。
2、加樣:向上述包被好的反應(yīng)液中加入0.1ml的特定稀釋待測(cè)樣品,37℃孵育1小時(shí)。然后洗。 (同時(shí)創(chuàng)建空白孔、陰性對(duì)孔和陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 酶標(biāo)抗體的加入:每個(gè)反應(yīng)孔中加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(滴定后稀釋?zhuān)?.1ml。在 37°C 下孵育 0.5-1 小時(shí)并洗滌。
4、加入底物溶液顯色:在每個(gè)反應(yīng)孔中加入0.1ml臨時(shí)配制的TMB底物溶液,37℃孵育10-30分鐘。
5. 反應(yīng)結(jié)束:向每個(gè)反應(yīng)孔中加入 0.05 ml 2M 硫酸。
6、結(jié)果的判斷:在白色背景上可以用肉眼直接觀察結(jié)果。反應(yīng)孔越深,陽(yáng)性反應(yīng)越強(qiáng),陰性反應(yīng)無(wú)色或非常淺。表示“-"符號(hào)。您還可以測(cè)量 OD 值。用ELISA檢測(cè)器在450nm(ABTS顯色時(shí)為410nm),用空白對(duì)照孔調(diào)零,如果大于OD值的2.1倍,測(cè)量各孔的OD值。的陰性對(duì)照為陽(yáng)性。
間接法
1. 用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10 μg/ml,每孔加入0.1 ml,4℃過(guò)夜;
2.次日洗3次;
3、在上述反應(yīng)孔中加入0.1ml稀釋的待測(cè)樣品(未知抗體),37℃孵育1小時(shí),洗滌;
4.(同時(shí)進(jìn)行空白、陰性和陽(yáng)性孔對(duì)照)反應(yīng)孔中加入新鮮稀釋的酶標(biāo)二抗0.1mL;
5. 37°C孵育35-60分鐘,洗滌;
6.' 最后用 DDW 洗滌。
其余步驟同“Double Antibody Sandwich Methods"的4、5、6。
可概括四個(gè)方面:
1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。
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