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廣州奧瑞達生物科技有限公司
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MLXK1393-人高爾基體蛋白73 (ELISA)試劑盒
  • MLXK1393-人高爾基體蛋白73 (ELISA)試劑盒
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貨物所在地:廣東廣州市

地: 廣州市天河區

更新時間:2025-03-11 21:00:45

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產品名稱:人高爾基體蛋白73 (ELISA)試劑盒
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
產品規格:48T/96T
產品形狀:盒裝液體
保存條件:2-8℃
有效期:6個月
檢測方法:酶聯免疫吸附法
檢測波長:450nm
研究領域:神經生物學,新陳代謝,免疫學,其它研究
運輸:快遞送貨上門,運輸保存條件苛刻產品可單獨送貨上門



人高爾基體蛋白73 (ELISA)試劑盒

本試劑僅供研究使用

試劑盒組成:


試劑盒組成 48 孔配置 96 孔配置 保存


說明書 1 份 1 份


封板膜 2 片(48) 2 片(96)


密封袋 1 個 1 個


酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存


標準品:90ng/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存


標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存


酶標試劑 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存


樣品稀釋液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存


顯色劑 A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存


顯色劑 B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存


終止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存


濃縮洗滌液 (20ml×20 倍)×1 瓶 (20ml×30 倍)×1 瓶 2-8℃保存


樣本處理及要求:


1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上

清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。


2. 血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心

20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次

離心。


3. 尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程

中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。


4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/

分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞

濃度達到 100 萬/ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分

鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。


5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備

用。標本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器

將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待

檢測,其余冷凍備用。


6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上

進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.


7. 不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔 10 孔,在第一、第二孔中分別加標

準品 100μl,然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液 50μl,混勻;然后從第一孔、第二

孔中各取 100μl 分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液 50μl,

混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 棄掉,再各取 50μl 分別加到第五、第六孔

中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液 50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中

取 50μl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50μl,混

勻后從第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準

品稀釋液 50μl,混勻后從第九第十孔中各取 50μl 棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為 50μl,

濃度分別為 60ng/L,40ng/L ,20ng/L,10ng/L, 5ng/L)。


2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣

品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣

品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混

勻。


3. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。


4. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。


5. 配液:將 30(48T 的 20 倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30(48T 的 20 倍)倍稀釋后備用。


6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 后棄去,如此


重復 5 次,拍干。


7. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

10 分鐘.


8. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。


9. 測定:以空白孔調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止

液后 15 分鐘以內進行。

人高爾基體蛋白73 (ELISA)試劑盒

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