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產品簡介
詳細介紹
DL-Cyto-Fix & Perm Kit主要應用于細胞內細胞因子或其他細胞質分子染色，可固定并透化細胞，進而對細胞內蛋白質進行染色。C-Perm/Wash Buffer經過反復優化，可減少非特異性染色并大化特異性熒光信號強度。流式胞內染色試劑盒
流式胞內染色試劑盒
產品特點
特異性強，熒光信號強度高
產品成分
產品名稱 | Cat log # | 規格 | 儲存條件 |
流式核內染色試劑盒 | MD-20002 | 1 kit | |
Fix/Buffer (1X) | MD-20002-F | 125ml | 4℃ |
| C-Perm/Wash Buffer (10X) | MD-20002-PW | 100ml | 4℃ |
試劑配制
工作濃度C-Perm/Wash Buffer（1X）：將1體積C-Perm/Wash Buffer (10X)加入9體積的去離子水，如將1ml C-Perm/Wash Buffer (10X) 加入9ml的去離子水，配制成10ml的1X C-Perm/Wash Buffer。1X C-Perm/Wash Buffer可保存在4℃并于一周內使用。
使用說明
（請詳細閱讀使用說明后再開始相關實驗）
1.細胞刺激：根據所使用細胞和所需檢測的分子特性，預先處理細胞。如所檢測胞內分子為分泌型分子，需提前使用高爾基阻斷試劑阻斷檢測分子的分泌從而將所測分子滯留在細胞內以便后續檢測。
2.表面染色（可選）：收集細胞后，每管加入50ul表面染色緩沖液和適量體積的表面抗體，充分重懸細胞，4℃，避光孵育30min后，加入500ul表面染色緩沖液，300g×5min，4℃離心，棄去上清液；
3.向每管細胞中加入200ul Fix Buffer (1X)，充分重懸細胞，4℃避光孵育12分鐘；
注：務必控制固定孵育溫度和時間，改變孵育條件可能導致染色結果誤差！注：建議細胞密度不高于10^7/ml；如細胞量多，可根據細胞量等比增加所使用Fix Buffer的量。
4.向每管細胞中加入500ul 1X C-Perm/Wash Buffer；
5.600g×5min離心，4℃，棄去上清液；
6.抗體孵育：每管加入100ul 1X C-Perm/Wash Buffer和適量體積的胞內抗體，充分重懸細胞；
7.2-8°C避光孵育1h以上或過夜；
8.向每管細胞中添加500ul 1X C-Perm/Wash Buffer，洗去抗體；
9.600g×5min離心，4 ℃，棄去上清液；
10.將細胞重懸于300ul-500ul 1X C-Perm/Wash Buffer進行上機分析。
注：在室溫下保存時，樣品應在2小時內進行上機分析；在2-8°C下保存時，應在24小時內分析樣品。