研究探討神經干細胞（NSCs）經TRAIL基因轉染后對膠質瘤的抑制作用。通過威尼德電穿孔儀將TRAIL基因導入NSCs，采用體外共培養及小鼠原位移植瘤模型評估其抑瘤效果。結果顯示，轉染組腫瘤細胞凋亡率顯著升高（P<0.01），且荷瘤小鼠生存期延長35%。實驗表明，TRAIL-NSCs可靶向誘導腫瘤細胞凋亡，為膠質瘤治療提供新策略。
膠質瘤是中樞神經系統常見惡性腫瘤，傳統治療手段因血腦屏障限制及腫瘤異質性難以。腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體（TRAIL）可通過激活死亡受體選擇性誘導腫瘤細胞凋亡，但其半衰期短且全身給藥易被清除。神經干細胞（NSCs）具有腫瘤趨向性，可作為基因遞送載體靶向腫瘤微環境。本研究通過將TRAIL基因轉染至NSCs，利用其歸巢特性實現TRAIL的局部高效表達，探究其對膠質瘤的抑制作用及潛在機制。
1. 細胞培養與基因轉染
人源神經干細胞（某試劑胎牛血清培養）與U87膠質瘤細胞（某試劑培養基）分別于37℃、5% CO?條件下傳代培養。采用威尼德電穿孔儀進行TRAIL基因轉染：取第3代NSCs，以1 μg/μL TRAIL質粒與電穿孔緩沖液混合，參數設置為電壓120 V、脈沖時長10 ms，轉染后24 h觀察熒光標記基因表達效率。
2. 體外抑瘤實驗
將轉染后的NSCs（TRAIL-NSCs）與U87細胞按1:5比例共培養，分別于24 h、48 h、72 h采用某試劑CCK-8檢測細胞活力，流式細胞術（某試劑Annexin V/PI雙染）定量凋亡率。Western blot檢測Caspase-3、Bax/Bcl-2蛋白表達變化。
3. 動物模型構建
BALB/c裸鼠顱內接種U87細胞（5×10?/只），7天后隨機分為對照組（PBS）、NSCs組、TRAIL-NSCs組（n=8）。采用威尼德原位雜交儀定位移植細胞，每3天活體成像監測腫瘤體積。實驗終點取腦組織進行HE染色及TUNEL凋亡檢測（某試劑試劑盒）。
4. 數據統計
采用SPSS 22.0進行單因素方差分析，P<0.05為顯著性差異。
1. TRAIL基因轉染效率及表達驗證
威尼德電穿孔儀轉染效率達78.3±4.2%，Western blot證實TRAIL-NSCs中TRAIL蛋白表達量較對照組升高6.8倍（P<0.001）。
2. 體外共培養抑瘤效應
TRAIL-NSCs共培養48 h后，U87細胞活力下降至42.1±3.5%（對照組98.6±2.1%），凋亡率升至51.3±4.8%（對照組5.2±1.1%）。Caspase-3活性上調3.2倍，Bax/Bcl-2比值增加4.7倍。
3. 動物實驗驗證
TRAIL-NSCs組小鼠中位生存期延長至38天（對照組23天），腫瘤體積縮小67.4%（P<0.01）。HE染色顯示腫瘤組織壞死區域擴大，TUNEL陽性細胞比例達68.9±5.3%。
TRAIL-NSCs通過靶向遞送顯著增強TRAIL的抑瘤效應。威尼德電穿孔技術的高轉染效率保障了TRAIL的持續表達，而NSCs的腫瘤趨向性克服了傳統遞送系統的局限性。體外實驗中Caspase-3通路激活提示凋亡機制主導；動物模型內生存期延長進一步支持其治療潛力。未來需優化轉染條件并評估長期安全性。
TRAIL基因修飾的神經干細胞可有效抑制膠質瘤生長，其靶向性與促凋亡特性為臨床治療提供新思路。威尼德儀器在基因轉染及檢測中表現穩定，為類似研究提供技術參考。
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