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胎牛血清有沉淀正常嗎

閱讀:317      發(fā)布時間:2025-4-8
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胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)在儲存或使用過程中出現(xiàn)少量沉淀通常是正常現(xiàn)象,但需根據(jù)沉淀的性質(zhì)和實驗需求判斷是否需要處理。以下是具體分析

一、沉淀的常見原因

1. 纖維蛋白原聚合:
胎牛血清中含有纖維蛋白原(Fibrinogen),在解凍或長期靜置后可能形成絮狀或顆粒狀沉淀(肉眼可見白色絮狀物)。這是最常見的正常現(xiàn)象。

2. 磷酸鈣結(jié)晶:
血清中的鈣、磷離子在低溫或反復凍融時可能形成細微結(jié)晶(顯微鏡下可見)。

3. 脂蛋白聚集:
血清中的脂類成分在低溫下可能析出,形成渾濁或沉淀。

4. 蛋白質(zhì)變性:
高溫、劇烈震蕩或反復凍融可能導致部分蛋白質(zhì)變性沉淀(通常伴隨顏色變化或渾濁)。

二、如何判斷是否正常?

特征

正常沉淀

異常變質(zhì)

顏色

血清仍為淡黃色、透明

渾濁、發(fā)紅或發(fā)黑

沉淀形態(tài)

白色絮狀或細顆粒,可溶解于37°C水浴

塊狀、無法溶解,或伴有異味

細胞培養(yǎng)影響

通常不影響細胞生長

細胞死亡、貼壁差或污染


三、如何處理沉淀?

常規(guī)操作:

將血清置于 37°C水浴 中輕輕搖晃至沉wanquan溶解(纖維蛋白原或磷酸鈣沉淀通常可逆)。

溶解后 4°C靜置1小時,取上清液使用(避免吸取底部沉淀)。

過濾除菌:
若沉淀較多或?qū)嶒灻舾校ㄈ绺杉毎囵B(yǎng)),可用 0.22μm濾膜 過濾后使用。

四、需要更換血清的情況

以下情況可能提示血清變質(zhì),建議停止使用:

1. 沉淀無法通過37°C溶解,且血清渾濁、變色。

2. 血清有明顯異味(如酸敗味)。

3. 使用后細胞出現(xiàn)異常死亡或污染。

五、如何減少沉淀產(chǎn)生?

1. 分裝凍存:避免反復凍融,按需分裝為小份(如50ml/管),-20°C保存。

2. 緩慢解凍:4°C過夜解凍,或室溫靜置至部分融化后混勻。

3. 輕柔操作:避免劇烈搖晃或高溫環(huán)境(如長時間置于37°C水浴)。

總結(jié)

少量白色絮狀沉淀(纖維蛋白原相關(guān))是正常現(xiàn)象,不影響大多數(shù)實驗;若沉淀不可逆、血清性狀改變或影響細胞活性,則需更換新批次血清。建議選擇正規(guī)品牌(如GibcoHyClone)并嚴格按說明書儲存!

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