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南京科捷教您怎樣選擇液相色譜柱

閱讀:1593        發布時間:2011-11-11
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    南京科捷檢測科技發展有限公司

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     現代液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇中。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,必須對此有一定的認識和了解。

一、硅膠基質填料
1、正相色譜
正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團,如胺基團(ZH2,APS)和氰基團(CN,CPS)的鍵合相填料。
由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團的極性教強,因此,分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小,即極性強落的組份zui先被沖洗出色譜柱。
正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯(Chloroform) 二氯甲烷(Methylence  Chloride)等.
2、反相色譜
反相色譜填料常是以硅膠為基礎,表面鍵合有極性相對教弱的官能團的鍵合相。
反相色譜所使用的流動相極性教強,通常為水,緩沖液與甲醇,已腈等混合物。
樣品流出色譜柱的順序是極性教強組合zui先被沖出,而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留。
常用的反相填料有C18(ODS) C8(MOS)。C4(B)C6H5(Phenyl)等。
二、聚合物填料
聚合物調料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸至等,其主要優點是在PG值為1-14均可使用。
相對與硅膠基質的C18填料,這類填料具有更強的淑水性;大孔的聚合物填料對蛋白質等樣品的分離非常有效。
現在的聚合物填料的缺點是相對硅膠基質填料,色譜柱柱效教低。

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