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反相液相色譜結合柱前衍生化法測定人血清中L-門冬酰胺
氨基酸是蛋白質的基本結構單位，是人體完成生理功能的必須物質，人類許多疾病的發生和發展與血液循環中氨基酸的變化有密切聯系。因此，血液中氨基酸水平在臨床中可作為一些疾病的診斷指針。監測體內氨基酸水平的變化，對疾病的診斷和治療有重要參考價值。
門冬酰胺是機體合成蛋白質的重要氨基酸之一，在體內可水解為門冬氨酸和氨，體內正常細胞也可通過門冬酰胺合成酶合成L-ASN。1996年，Yellin and Wriston研究發現淋巴瘤細胞中門冬酰胺合成酶活性低，不能合成足夠的L-ASN，必須從血液循環只能獲取L-ASN以合成蛋白質，門冬酰胺酶能催化L-ASN水解，迅速耗竭血液循環中的L-ASN，使腫瘤細胞不能獲得足夠的L-ASN導致蛋白合成抑制而凋亡，故門冬酰胺酶對淋巴瘤細胞有選擇性細胞毒作用。目前，天然的火聚乙二醇修飾的ASNase已成為兒童急性淋巴細胞白血病聯合化療方案中的重要組成部分，對維持患兒持續*緩解（CCR）起著不可替代的作用。
本文建立網絡鄰苯二甲醛柱前在線衍生反相液相色譜法，在方法學建立時采用L-ASN耗竭空白人血清作為空白生物基質，能夠快速、準確測定人血清中L-ASN，在臨床研究中可用于監測ASNase治療過程中患兒體內L-ASN的耗竭程度，為優化給藥方案，降低不良反應提供重要依據。
儀器準備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統。使用WS600工作站可以同時控制數臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等，實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
應用領域
化合物檢測、法醫毒物分析、蛋白質組學食品檢測、藥物分析、環境分析、聚合物分析
色譜條件：
色譜柱 | Agilent ZORBAX Zclipse AAA（4.6mm×150mm，5μm） |
流動相 | A:0.01mol.L磷酸鹽緩沖液（pH=7.8） B：水-甲醇-乙腈（10:45:45） |
梯度洗脫程序 | 0-17min，29%B,18-32min，100%B，33-37min，29%B； |
進樣量 | 15μL |
流速 | 1ml/min |
測定結果：
