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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> 復(fù)蘇/凍存MLE-12小鼠肺上皮細(xì)胞

MLE-12小鼠肺上皮細(xì)胞
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參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 ATCC
  • 型號(hào) 復(fù)蘇/凍存
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海
屬性

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更新時(shí)間:2024-06-28 19:02:34瀏覽次數(shù):744評(píng)價(jià)

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貨號(hào) YLK-XB0394h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研
MLE-12小鼠肺上皮細(xì)胞別名:MLE-12細(xì)胞;小鼠肺上皮細(xì)胞。來源:肺;上皮細(xì)胞;SV40轉(zhuǎn)化;FVB/N。

MLE-12小鼠肺上皮細(xì)胞


簡(jiǎn)稱:MLE-12


中文名:小鼠肺上皮細(xì)胞


別名:MLE-12細(xì)胞;小鼠肺上皮細(xì)胞


種屬:小鼠


來源:肺;上皮細(xì)胞;SV40轉(zhuǎn)化;FVB/N


培養(yǎng)條件:H-DMEM+10%FBS+1%雙抗


培養(yǎng)環(huán)境:空氣,95%; 二氧化碳 (CO2),5%


狀態(tài):貼壁


NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.


細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟:

1. 吸走多余培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞;

2. 吸干凈PBS后

加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細(xì)胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;

(細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感,消化過度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(zhǎng)。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時(shí)即可終止,禁止消化到細(xì)胞*漂浮。混勻細(xì)胞時(shí)盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)

3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細(xì)胞混勻;

4. 將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);

傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定,大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。


注意事項(xiàng):不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。



Cell cryopreservation

1.凍存液:92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇)

2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。


凍存方法:

1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存。



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