土壤有效硫試劑盒說明書
微量法100T/96S
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
土壤硫對農林畜牧具有重要作用，環境中許多污染物都是含硫化合物，通過大氣傳輸沉降到土壤中，對生態系統產生一定的影響，土壤中的硫可被植物吸收利用。
測定原理：
利用硫酸鋇比濁法測定。
自備實驗用品及儀器：
天平、常溫離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀。
試劑組成和配制：
酸性土壤提取液：液體105mL×1瓶，4℃保存。
堿性土壤提取液：液體105mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體0.5mL×1支，4℃保存。
試劑二：液體4mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體8mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體4mL×1瓶，4℃保存。
樣本處理：
新鮮土樣風干，過20目篩，按照土壤質量（g）：提取液體積(mL)為1：5的比例（建議稱取約0.2g土樣，加入1mL提取液），振蕩提取1h，10000g ，25℃離心10min，取上清液待測。
測定操作表：
空白管 | 測定管 | |
樣本（μL） | 40 | |
提取液（μL） | 40 | |
試劑一（μL） | 5 | 5 |
90℃開蓋消煮5min，取出自然冷卻 | ||
試劑二（μL） | 40 | 40 |
試劑三（μL） | 80 | 80 |
試劑四（μL） | 40 | 40 |
充分混勻，25℃震蕩20min | ||
于微量石英比色皿/96孔板，蒸餾水調零，測定440nm處吸光值A，分別記為A空白管和A測定管，△A=A測定管-A空白管 | ||
計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.0104x + 0.0009，R2 = 0.9999
有效硫含量（mg/kg）=（△A-0.0009）÷ 0.0104÷（W÷V樣總）
= 96.15×（△A-0.0009）÷W
V樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質量，g
b. 用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.0052x + 0.0009，R2 = 0.9999
有效硫含量（mg/kg）=（△A-0.0009）÷ 0.0052÷（W÷V樣總）
=192.3×（△A-0.0009）÷W
V樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質量，g
注意事項：
1. 酸性和堿性土壤提取液不一樣，提取前必須確認土壤的酸堿性，加入對應的提取液。
2. 90℃消煮必須開蓋，使試劑一wan全散出。
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