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土壤無機磷(S-PHOS)含量測定試劑盒說明書

閱讀:482      發布時間:2023-10-09
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土壤無機磷S-PHOS含量測定試劑盒說明書

                                              微量法100T/96S

 

   :正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:  

磷是植物必需大量元素。植物主要通過根系從土壤中獲取磷元素。土壤磷包括有機磷和無機磷。土壤有機磷經過礦化分解而轉化為無機磷,才能進一步被植物吸收利用。

 

測定原理:

從土壤中提取無機磷,在酸性環境中,通過鉬藍法定磷,即可計算出無機磷含量。

 

自備儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、可調式水浴鍋,分析天平、可調式移液器、蒸餾水和100目篩子。

 

試劑組成和配制:

提取液:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前配制,加入8mL蒸餾水,充分溶解后加入4mL試劑二,混勻。

標準品:液體×1支,20μmol/L無機磷標準液,4℃保存。

 

土壤無機磷提取:

10mL離心管,加入精確稱取的100目篩子過篩的風干土樣約0.01g,加入1mL提取液,震蕩混勻,然后置于40℃水浴浸提1h8000g25,離心10min,取上清液,待測。

 

測定步驟:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min以上,調節波長到660 nm,蒸餾水調零。

2. 打開水浴鍋,調節溫度到40℃。

3. 空白管:EP管,依次加入100μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A空白管。

4. 標準管:EP管,依次加入10μL標準液,90μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A標準管。

5. 測定管:EP管,依次加入10μL上清液,90μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A測定管。

需在40min內完成比色。

注意:空白管和標準管只需測定一次。

 

土壤無機磷含量計算公式:

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

S-PHOSμmol /g 干重)=[C標準液×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)]×V總÷W

                    

 =0.02×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)÷W

C標準液:20 μmol/LV總:總上清液體積,1 mL=0.001 LW:土壤樣品質量,g

 

b.使用96孔板測定的計算公式如下

S-PHOSμmol /g干重)=[C標準液×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)]×V總÷W

                      =0.02×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)÷W

C標準液:20 μmol/LV總:總上清液體積,1 mL=0.001 LW:土壤樣品質量,g

 

注意事項:

1.        試劑三需臨用前配制,限當天使用。試劑三配制過程中,可能會產生黑色固體,其不影響結果,注意吸取時不要將黑色固體吸入。

2.        40min內完成比色。

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優利科(上海)生命科學有限公司

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