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ELSD革新技術(shù)帶來(lái)無(wú)與倫比的LNP分析體驗(yàn) | 安捷倫脂質(zhì)納米顆粒分析解決方案
剛剛過(guò)去的金秋十月里，諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)如期而至，mRNA 疫苗開發(fā)者 Katalin Kariko 博士和 Drew Weissman 博士獲此殊榮。基于 mRNA 技術(shù)的新冠疫苗改變了全球?qū)剐鹿诘母窬郑麄兊墨@獎(jiǎng)是眾望所歸。在 mRNA 的眾多前沿技術(shù)中，脂質(zhì)納米顆粒（LNP）技術(shù)顯得至關(guān)重要，它是 mRNA 進(jìn)入人體內(nèi)的必須運(yùn)送載體。
脂質(zhì)納米顆粒的研究可以追溯到上世紀(jì) 80 年代，科學(xué)們通過(guò)不斷的探索和實(shí)驗(yàn)，找到了各種適合的脂質(zhì)。利用微流體技術(shù)將脂質(zhì)和核酸進(jìn)行混合，從而成功制備出納米脂質(zhì)顆粒。根據(jù)組成脂質(zhì)納米顆粒的脂質(zhì)特性（圖 1），我們選擇使用 Infinity II LC 液相色譜系統(tǒng)對(duì) LNP 進(jìn)行分析和表征。
圖 1. 脂質(zhì)納米顆粒的示意圖
以上市的 RNAi 藥物 Onpattro 為例，采用 HPLC-ELSD 分析方法，1290 Infinity II ELSD 檢測(cè)器針對(duì)無(wú)紫外吸收的四種脂質(zhì)具有較高的靈敏度和較好的穩(wěn)定性，完全滿足實(shí)際樣品的分析需求（圖 2）。
圖 2. LNP 中四種脂質(zhì)的色譜圖
隨著 LNP 技術(shù)的不斷更新，可電離脂質(zhì)的種類變得越來(lái)越豐富，新冠 mRNA 疫苗的 LNP 由可電離陽(yáng)離子脂質(zhì)（SM-102）、聚乙二醇聚合物、膽固醇和 DSPC 組成，基于以上方法，也可以將這四種脂質(zhì)進(jìn)行很好的分離和準(zhǔn)確定量（圖 3）。
圖 3. 新冠 mRNA-LNP 疫苗中四種脂質(zhì)的色譜圖
基于 1290 Infinity II UHPLC 和 1290 Infinity II ELSD 的超高效液相色譜系統(tǒng)，可以實(shí)現(xiàn)超快速高效率的 LNP 分析，總的分析時(shí)間在 5 分鐘以內(nèi) [2]（圖 4），極大提升分析效率。
圖 4. UHPLC-ELSD 分析 LNP 色譜圖（七針疊加圖）
在 UHPLC-ELSD 的基礎(chǔ)上引入了單桿質(zhì)譜 MSD，與 ELSD 并聯(lián)于 UHPLC 系統(tǒng)中（圖 5），作為脂質(zhì)降解物定性分析的工具，可以清晰看到脂質(zhì)及其降解產(chǎn)物質(zhì)譜圖（圖 6），從而可以對(duì)降解雜質(zhì)進(jìn)行深入研究。
圖 5. UHPLC-ELSD/MS 儀器連接示意圖
圖 6. 脂質(zhì)分析的質(zhì)譜圖
安捷倫最新的 1290 Infinity II ELSD 檢測(cè)器，配置了特殊光電倍增管和性能出眾的激光器件，靈敏度比常規(guī) ELSD 高出 5-10 倍，更適合痕量分析（圖 7）。獨(dú)特的霧化噴頭設(shè)計(jì)，具有出色的穩(wěn)定性，為使用者提供可靠、準(zhǔn)確的分析結(jié)果。
圖 7. 1290 Infinity II ELSD 檢測(cè)器更高的靈敏度
結(jié)語(yǔ)
Infinity II LC 儀器搭配 1290 Infinity ELSD 檢測(cè)器（或單桿質(zhì)譜）為脂質(zhì)的研究帶來(lái)了嶄新的分析體驗(yàn)，隨著脂質(zhì)納米顆粒 LNP 研究的深入，安捷倫的液相色譜技術(shù)將助力 LNP 應(yīng)用于更廣闊的領(lǐng)域。