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caspase-3抗體操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,效率高

時(shí)間:2022-6-15 閱讀:1749
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  caspase-3抗體是位于哺乳動(dòng)物細(xì)胞凋亡通路下游關(guān)鍵的死亡蛋白酶。正常情況下,胞質(zhì)中的Caspase-3以無活性的酶原形存在,細(xì)胞凋亡信號(hào)的出現(xiàn)可導(dǎo)致Caspase-3裂解、活化,活化的Caspase-3又進(jìn)一步導(dǎo)致蛋白酶級(jí)聯(lián)切割放大,最終使細(xì)胞走向死亡。
  因此Caspase-3表達(dá)量可以直接反映細(xì)胞凋亡程度。細(xì)胞凋亡程度Caspase-3是細(xì)胞凋亡過程中最關(guān)鍵的執(zhí)行分子(keyexecutioner)之一,可以剪切細(xì)胞凋亡過程中的許多關(guān)鍵蛋白,例如PARP。
  caspase-3抗體的激活需要從沒有活性的全長(zhǎng)Caspase-3(35kD),在Asp28和Ser29之間及Asp175和Ser176之間進(jìn)行剪切,產(chǎn)生有活性的17kD肽段。Caspase-3抗體可以識(shí)別全長(zhǎng)的Caspase-3(35kD),也可以識(shí)別Caspase-3被剪切后產(chǎn)生的17kD片斷。未發(fā)現(xiàn)和其它Caspase家族蛋白有交叉反應(yīng)。
  Caspase-3抗體可用于制備AnnexinV-FITC細(xì)胞凋亡試劑盒。所述試劑盒包括:0.6-0.8%BSA的PBS緩沖液,2.5-4%多聚甲醛的PBS緩沖液,含0.6-0.8%Triton-X-100和0.06-0.08%吐溫40的PBS緩沖液,兔抗caspase-3抗體,帶有Alexa-Fluor488綠色熒光素標(biāo)記的山羊抗兔IgG二抗,18-22μM-DAPI的PBS緩沖液。
  所述兔抗caspase-3抗體是用合成的caspase-3蛋白中靠近Asp175的氨基末端殘基的多肽抗原免疫兔子獲得的多克隆抗體;兔抗caspase-3抗體按1:600的體積比稀釋于封閉液中。所述山羊抗兔IgG二抗按1:600的體積比稀釋于封閉液中;其中,所述封閉液為含10%山羊血清和0.06-0.08%吐溫40的PBS液。上述試劑盒能對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行準(zhǔn)確定性和定量檢測(cè),靈敏度高、特異性強(qiáng),操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,效率高。

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