成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

北京博奧森生物技術有限公司

蛋白的3種提取方法

時間:2022-5-17 閱讀:2911
分享:
  1.單層貼壁細胞總蛋白的提取
 
  倒掉培養液,并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養液(或將瓶直立放置一會兒使殘余培養液流到瓶底然后再用移液器將其吸走)。
 
  每瓶細胞加3ml 4℃預冷的PBS(0.01M pH=7.2~7.3)。平放輕輕搖動1min洗滌細胞,然后棄去洗液。重復以上操作兩次,共洗細胞三次以洗去培養液。將PBS棄凈后把培養瓶置于冰上。
 
  按1ml裂解液加10μl PMSF(100mM),搖勻置于冰上。(PMSF要搖勻至無結晶時才可與裂解液混合。)
 
  每瓶細胞加400μl含PMSF的裂解液,于冰上裂解30min,為使細胞充分裂解培養瓶要經常來回搖動。
 
  裂解完后,用干凈的刮棒將細胞刮于培養瓶的一側(動作要快),然后用槍將細胞碎片和裂解液移至1.5ml離心管中。(整個操作盡量在冰上進行。)
 
  于4℃下12000 rpm離心5min。(提前開離心機預冷)將離心后的上清分裝轉移倒0.5min的離心管中放于-20℃保存。
 
  
 
  2.組織中總蛋白的提取
 
  將少量組織塊置于1~2ml勻漿器中球狀部位,用干凈的剪刀將組織塊盡量剪碎。
 
  加400μl單去污劑裂解液裂(含PMSF)于勻漿器中,進行勻漿。然后置于冰上。
 
  幾分鐘后再碾一會兒再置于冰上,要重復碾幾次使組織盡量碾碎。
 
  裂解30min后,即可用移液器將裂解液移至1.5ml離心管中,然后在4℃下12000 rpm離心5min,取上清分裝于0.5ml離心管中并置于-20℃保存。
 
  加藥物處理的貼壁細胞總蛋白的提取由于受藥物的影響,一些細胞脫落下來,所以除按1)操作外還應收集培養液中的細胞。
 
  
 
  3.培養液中細胞總蛋白的提取
 
  將培養液倒至15ml離心管中,于2500 rpm離心5min。
 
  棄上清,加入4ml PBS并用槍輕輕吹打洗滌,然后2500 rpm離心5min。棄上清后用PBS重復洗滌一次。
 
  用槍洗干上清后,加100μl裂解液(含PMSF)冰上裂解30min,裂解過程中要經常彈一彈以使細胞充分裂解。
 
  將裂解液與培養瓶中裂解液混在一起4℃、12000 rpm離心5min,取上清分裝于0.5ml離心管中并置于-20℃保存。
 

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話 產品分類
在線留言
主站蜘蛛池模板: www.欧美激情| 亚洲色无码A片一区二区麻豆| 国产精品顶级A片无码久久久| 国产精品毛片久久久久久| 亚洲伊人久久综合影院2021| 999国产高清在线精品| 亚洲综合激情另类小说区| 欧美一区二区三区婷婷月色| 欧美日韩在线观看网站| 日韩国产三级在线| 欧美一线高本道高清免费| av毛片午夜不卡高潮喷水| 日韩高清中文字幕一区二区| 91精品久久久久亚洲国产| 偷拍自偷 亚洲 欧美20P| 五月开心六月伊人色婷婷| 久久精品一区二区日韩av| 欧美激情αv一区二区三区| 精品久久久久久久一区二区| 少妇精品久久久一区二区三区| 宝贝腿开大一点你真湿H| 日本VA在线视频播放| 欧美日韩国产你懂的| 日韩国产欧美综合在线| 欧美日韩亚洲精品| 特级做A爰片毛片A片免费| 在线观看黄色91| 无码国产欧美一区二区三区| 日日做A爰片久久毛片A片英语| 无码任你躁久久久久久久| 99热久久精品国产一区二区| 久久亚洲国产欧美日韩| 毛片无码免费无码播放| 曰本道人妻丰满AV久久| 成年美女黄网站色大免费视频| 国产三级在线精品区| 2021理论片一级| 亚洲日韩一区二区一无码| 嗯啊HH禁忌翁公| 欧美一区二区三区精品久久| 国产超A级动作大片中文字幕|