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1. 該試劑已經過預稀釋，可按每次測試的推薦體積使用。我們通常在 100 μl 實驗樣品中使用 1 × 10^6 個細胞（測試）。

2. 同型對照應使用與目標抗體濃度相同的濃度。

3. 注意：

4. 在酸性條件下產生劇毒的肼氮酸。丟棄前，請在流水中稀釋疊氮化物化合物，以避免潛在爆炸性沉積物在管道中積聚。

5. 有關熒光染料光譜和合適的儀器設置

6. PE-Cy5 是由 R-藻紅蛋白 （PE） 組成的串聯熒光染料，其被氬離子激光器的 488 nm 光激發，并作為能量供體與花青染料 Cy5 偶聯，后者充當能量受體并在 670 nm 處發出熒光。BD Biosciences Pharmingen最大限度地提高了PE-Cy5中的熒光染料能量轉移，從而最大限度地提高了其熒光發射強度，最大限度地減少了PE的殘余發射，并最大限度地減少了批次間的變化。

7. PE-Cy5 經過優化，可與發射 488 nm 光的單氬離子激光器配合使用。由于 PE-Cy5 串聯熒光染料的吸收光譜較寬，因此在使用可能直接激發 PE 和 Cy5™ 的雙激光細胞儀時必須格外小心。

8. Cy 是 GE Healthcare 的商標。

9. 在產品開發中檢測到的物種交叉反應性可能尚未在每種規格和/或應用中得到證實。

10. 請遵守以下預防措施：可見光的吸收會顯著改變任何串聯熒光染料偶聯物中發生的能量傳遞;因此，我們建議采取特殊的預防措施（例如用鋁箔包裹樣品瓶、試管或架子），以防止偶聯試劑（包括用這些試劑染色的細胞）暴露在室內照明下。

11. 據報道，PE-Cy5 串聯熒光染料可通過 Fc 受體結合某些類別的人巨噬細胞和粒細胞，并且 PE 可通過 Fc 受體與小鼠 B 淋巴細胞結合。小鼠白細胞與小鼠 BD Fc Block™ 純化的抗小鼠 CD16/CD32 mAb 2.4G2 預孵育可減少 PE-Cy5 偶聯試劑與小鼠 B 細胞的非特異性結合。然而，PE-Cy5 偶聯試劑不應用于 SJL、NOD 和 MRL 小鼠的脾細胞染色，因為據報道，無論是否使用小鼠 BD Fc 阻滯™，B 淋巴細胞和/或其他白細胞都會進行非特異性染色（CD72c 復合物與這些菌株中的 PE-Cy5 結合有關）。與 PE、PerCP、PerCP-Cy5.5、APC 和 APC-Cy7 串聯熒光染料偶聯的試劑可用于這些小鼠品系的白細胞。

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