培養基的主要成分有氮源、碳源、無機鹽、水分及一些生長因子，它們主要為細菌的生長繁殖提供營養和生長環境。
水：水是良好的溶劑，細菌所需要的營養物質必須先溶于水，營養的吸收與代謝均需有水才能進行。制備培養基常用不含雜質的蒸餾水或離子交換水。
氮源：氮源主要用于構成菌體細胞物質（氨基酸、蛋白質、核酸等）和含氮代謝物。常用的氮源可分為兩大類：有機氮源和無機氮源。
碳源：碳源是組成培養基的主要成分之一。常用的碳源有糖類、油脂、有機酸和低碳醇。在特殊情況下（如碳源貧乏時），蛋白質水解產物或氨基酸等也可被某些菌種作為碳源使用。
無機鹽：無機鹽是細胞維持生命活動所的營養成分，主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl－、PO43-、SO42-、HCO3－等，主要作用為維持細胞培養液滲透壓平衡，參與細胞的代謝活動。此外，通過提供鈉，K+和Ca2+，幫助細胞調節細胞膜功能。
注意事項：
培養基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應該注意以下事項：
確認工作細胞庫是否被污染，確認毒種工作種子批是否被污染，確認所用培養基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用細菌、真菌及支原體無菌試驗來確認并排除。
同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中，可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養，48小時即可觀察有無污染。
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