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數(shù)字PCR定量檢測(cè)HBVcccDNA

閱讀:3184      發(fā)布時(shí)間:2021-9-28
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背景與目的:隱匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的準(zhǔn)確診斷需要HBsAg陰性者肝活檢組織中HBVDNA的證實(shí)。然而,在臨床實(shí)踐中,潛伏的OBI是通過(guò)發(fā)現(xiàn)抗Hb核心抗原的抗體(抗HBc)而推斷出來(lái)的。我們調(diào)查了抗HBc陽(yáng)性受試者中OBI的真實(shí)患病率和肝內(nèi)HBV的分子特征。

方法:對(duì)100例標(biāo)準(zhǔn)血清學(xué)抗-HBc陽(yáng)性的移植供者(平均年齡68.2歲;男64例,女36例),用巢式PCR檢測(cè)總HBVDNA,用數(shù)字PCR檢測(cè)HBVcccDNA(線性:R2=0.9998;定量和檢測(cè)下限分別為2.4和0.8拷貝/105細(xì)胞)。

結(jié)果:52%(52/100)的受試者存在真實(shí)的OBI狀態(tài),52%(27/52)的OBI陽(yáng)性者存在cccDNA,中位數(shù)為13拷貝/105細(xì)胞(95%可信區(qū)間5-25)。采用IgG型抗HBc特異性檢測(cè),HBVcccDNA陽(yáng)性獻(xiàn)血者的中位抗體水平顯著高于陰性獻(xiàn)血者

(5.7 [3.6-9.7] vs. 17.0 [7.0-39.2] COI, p=0.007)。經(jīng)多因素分析,抗-HBc IgG值>4.4cccDNA與肝內(nèi)HBVcccDNA的發(fā)現(xiàn)相關(guān)(OR=8.516,p=0.009),低于該值則排除其存在,陰性預(yù)測(cè)值為94.6%。

結(jié)論:采用一種新的基于ddPCR的內(nèi)部檢測(cè)方法,在大約一半的OBI病例中,肝內(nèi)HBV cccDNA可被定量檢測(cè)到。抗HBc IgG滴度可能是預(yù)測(cè)免疫抑制患者OBI再激活風(fēng)險(xiǎn)的有用指標(biāo)。



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