成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

深圳市安培生物科技有限公司
中級會員 | 第5年

19126518388

血清系列
細胞轉染
支原體清除
細胞凍存
實驗耗材
分子試劑
細胞增殖與凋亡
Biozellen系列
培養(yǎng)基
ELISA試劑盒
TOYOBO(東洋紡)
ZYMO RESEARCH
Greiner(格瑞納)
IKA(艾卡)
化學發(fā)光底物(ECL)
PROSPEC系列
Epigentek系列
微生物檢測
細胞生物學
Corning康寧
解離試劑
細胞類-實驗耗材
原代細胞
植物檢測系列試劑盒
SERANA
BSA
細胞系
生化試劑盒
環(huán)境檢測系列試劑盒(AKEN)
類器官培養(yǎng)
緩沖器和解決方案
生物三凝膠基質
細胞因子分子
生物樣本庫
蛋白研究系列
修飾檢測試劑盒

細胞周期檢測(流式細胞術)

時間:2022/10/18閱讀:2767
分享:

原理


流式細胞周期檢測是一種常見的檢測細胞增殖情況的方法之一,細胞在不同周期時,其內的DNA含量不同。碘化丙啶(PI)作為一種核酸嵌入型染料,能夠進入固定后的細胞中,與細胞內的核酸結合,其熒光強度與DNA含量成正比。通過流式細胞儀檢測不同細胞中的熒光強度,從而判定不同組別中細胞周期發(fā)生的變化。


用途


檢測不同組別或處理對某種細胞周期的改變。


材料與儀器


【器材】
流式細胞儀、移液器、槍頭、離心管、離心機、流式細胞儀、水浴鍋、流式管、濾頭;
【試劑】0.25% 胰蛋白酶溶液、PBS、RNA酶、PI染液、70% 乙醇溶液(建議提前放入負二十預冷);


步驟


1.以腫瘤細胞為例,將正常生長的對照或處理組腫瘤細胞計數,每組取2×105-3×105個細胞鋪板,待細胞貼壁后,將正常培養(yǎng)基替換為無血清1640培養(yǎng)基,同步化20 h,使得所有細胞都進入相同的細胞周期時期;同步完后,將培養(yǎng)基重新替換為正常含血清培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)24 h;
 
2.用不含EDTA的胰酶將細胞消化,收集細胞,300 g,離心3 min;用吸引器去除培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次,再次300 g,離心3 min;去除PBS,用提前預冷的70%酒精重懸細胞沉淀,4℃固定過夜;
 
3.4℃,1000 g,離心3-5 min,去除酒精,用PBS清洗3遍,最后一遍去除PBS;加入300 μL PBS,輕輕吹打,重懸細胞沉淀,加入相應量的Rnase至終濃度100 μg/mL,37 ℃水浴鍋中消化30 min;
 
4.上機前加入PI(5 mg/mL)至終濃度50 μg/mL,避光孵育15 min;孵育完后,過300目細胞篩,上機檢測;
 
5.分析數據。
  


注意事項


1. PI為致癌物質,避免用手直接接觸。

2. 細胞數目應該達到2x104個,細胞數目過少影響實驗結果的準確性。
 
3.鋪板的細胞數量以收獲細胞時有足夠的生長空間來動態(tài)調節(jié),現在的流式細胞儀靈敏度很高,不需要太多的細胞。
 
4. 在制備時,要清洗干凈酒精,特別注意清洗過程中細胞的損失。離心次數不宜過多,防止細胞丟失。
 
5. 可以用未處理的細胞調試流式細胞儀。
 
6.胰酶不加EDTA

 


常見問題


Q:酒精固定后細胞難以沉淀下來,導致細胞丟失較多;

A:可適當延長離心時間和轉速。


以上就是本期的內容,更多資訊,歡迎點擊安培生物網站鏈接了解更多技術與產品資訊

 

安培生物科技有限公司介紹:

安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規(guī)模生物生產、基因和細胞治療領域客戶,提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產,包括培養(yǎng)間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產服務;提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質膠產品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領域提供優(yōu)質的產品和技術服務,努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 老王轻一点儿好爽在深一点| 一受多攻同做全肉| 亚洲欧美中文无码蝴蝶| 国产JK精品白丝AV在线观看| 国产精品中文字幕日韩| 欧美一级片内射美女们| 国产偷国产偷亚洲清高| 国产传媒麻豆剧精品AV| 亚洲欧美日韩国产综合91| 欧美日韩国产精品一区二区| 理论片午午伦夜理片I| 国产日韩欧美精品在线| 2020精品极品国产色在线观看| 欧美激情欧美激情| 国产伦精品一区二区三区免费观看| 国产一区二区三区乱码在线观看| 最新日韩中文字幕| 欧美亚洲福利| 麻豆榴莲茄子草莓丝瓜富二代| 国产一区二区亚洲精品| 236宅宅最新理论片| 亚洲国产精品色情777777| 性高朝久久久久久久| 国产3级在线观看| 日韩 欧美 亚洲 高清| 精品亚洲国产成AV人片传媒| 久久婷婷五月综合色国产| 中文字幕久久亚洲| 久久久国产精品免费A片3D| 一女三男做2爱A片免| 日韩二区中文字幕| 亚洲欧美日韩一区二区三区| 亚洲性高清SUV| 韩国理伦三级电影| 国产福利视频情侣视频| 狠狠色丁香久久婷婷综合_中| 美女禁止的网站免费| 伦理电影我不卡87| 国产精品久久久久久亚洲调教| 小sao货屁股撅起来| 亚洲精品久久久无码|