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直播答疑 | 細胞培養實驗室的環境要求和監測方法

閱讀:1506      發布時間:2024-8-29
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普諾賽直播課

在8月20日普諾賽直播間中,左明祥老師為大家帶來了《細胞培養實驗室的環境要求和監測方法》的專題課程。

直播回放路徑

①可在“武漢普諾賽"微信視頻號查看;

B站搜索“普諾賽生物",點擊最新視頻觀看學習。


每一份好奇心都是推動科學進步的力量,針對大家在直播中提出的問題,我們特意邀請左老師為大家進行深入解答。


另外,我們誠摯地歡迎大家在評論區暢所欲言。無論是實驗技術問題還是感興趣的課程主題,我們都將傾聽您的每一個意見并積極回應,也會根據大家的需求定制專題講座。感謝您的參與和關注!






直播問題解答


過濾器和水盤如何清潔?

在正常情況(未出現污染)下,培養箱的水盤應使用75%酒精擦拭消毒,然后加入無菌水并添加適量的抑菌劑當培養箱出現污染時,可以使用新潔爾滅消毒液或3%的過氧化氫消毒液對水盤進行消毒,消毒時間為30 min。此外,也可以使用紫外燈進行消毒處理,消毒完成后用無菌水擦拭干凈,添加無菌水和抑菌劑后正常使用。

培養箱內的HEPA過濾器一般不需要單獨清潔,當使用出現異常時可以進行更換(需要專業維修人員更換)。對于超凈工作臺和生物安全柜中的過濾器,只需根據實際使用情況,定期(半年至一年)更換初效濾網即可。

消毒時間多久合適?

使用消毒液消毒,時間30 min左右即可;若使用的消毒液存在腐蝕性,應在消毒完成后使用無菌水將消毒液擦拭干凈。使用臭氧或紫外燈的消毒時間一般也是30 min。

怎樣檢測二氧化碳泄漏?

如果需要檢測泄漏至空氣中的CO2濃度,防止其濃度過高可能引發的窒息風險,可以使用專門的CO2濃度檢測儀,或者使用氧氣濃度監測儀(適用于多種氣體環境,如含CO2或氮氣的)。

如果是要檢測管道泄漏的位置,初步的檢查方法可以是使用肥皂水在管道的接頭位置進行涂抹,觀察是否出現氣泡;如需要準確檢測,則需專業人員使用專業檢測工具進行檢測。

細胞培養間的實驗服怎么消毒和存放比較合適?

實驗服在清洗完成之后,可以放在專用的滅菌袋中,再放進高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌處理。滅菌完成后,將實驗服連同滅菌袋一起放入烘箱中烘干備用。

臭氧消毒適用于什么實驗室?

臭氧消毒適用于配套有新風系統的實驗室。臭氧一般需要通過新風系統進入實驗室空間,并在空間內達到一定濃度才能起到較好的消毒效果。消毒完成之后,也需要通過新風系統將殘留的臭氧排出實驗室,否則會對實驗室環境產生影響。

支原體檢測沒有污染,但細胞狀態不好,考慮什么污染呢?

細胞狀態不好的因素有很多,首要且關鍵的一步是排除污染因素。如果通過各種檢測手段(細菌、真菌通過瓊脂板或空培檢測,支原體使用試劑盒檢測)都無法檢測到污染,則可能不是因污染導致的。

如果仍懷疑存在污染,可以嘗試向培養物中添加適當濃度的廣譜抗生素。如果添加抗生素后細胞狀態明顯好轉,說明確實存在某種難以檢測的微生物影響細胞狀態;如果添加抗生素后細胞狀態未出現好轉甚至更差,則需從其他方面排查細胞狀態不好的原因,如培養基成分、培養條件、細胞特性或外部操作因素等。




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