高壓蒸汽滅菌技術廣泛應用于微生物實驗室培養基、實驗器具、陽性廢棄物的日常滅菌。在滅菌過程中常有一些容易被忽視的問題影響滅菌效果，今天我們為大家總結高壓蒸汽滅菌鍋使用過程中應注意的幾個問題。
由于培養基的成份、理化性質等因素影響滅菌的效果，因此要根據培養基的特點來選擇滅菌的強度。
影響滅菌強度的因素：如果培養基中天然有機物含量高、顆粒大、雜菌多、水份低，菌袋或瓶內培養基的裝量多、通氣性差，鍋內滅菌物占鍋內容積的比例大，就需要提
高滅菌強度；反之，可適當降低滅菌強度，既可以減少能量 的消耗，又可以減少營養成分的破壞。
提高滅菌強度的方法：主要有提高滅菌溫度和延長滅菌時間，如果設備允許，以提高滅菌溫度的方法為好，因為提高滅菌溫度殺死雜菌的速度，要大于培養基中營養成分被破壞的速度。
如果發生污染的菌種是耐熱菌，說明滅菌時因滅菌強度不夠而導致發生污染， 如果
是接種操作、菌袋破損或封口問題，則應該是耐熱和不耐熱菌均有。
如果發生污染的時間較早，通常是培養基滅菌接種所帶來的污染。
在菌袋沒有破損的前提下，如果發生污染的部位是在非接種面，則說明是培養基本
身有雜菌。
在滅菌鍋內，熱的蒸汽不能直接到達的地方就是滅菌的死角，主要有菌袋之間的擠壓、菌袋或瓶與外界不通氣和鍋內設計上的死角。
菌袋之間如發生擠壓，其擠壓部位的透氣性降低，滅菌效果受到影響，為了防止擠
壓現象的發生，大的滅菌鍋內應設有用來分層的架子或先將菌袋放在筐內，并且保持
菌袋的高度要略比筐矮，防止擠壓，然后再將裝有菌袋的筐，擺到滅菌鍋里。
菌袋或菌瓶上要有內外通氣的結構設計。
袋口等，保證蒸汽的進入和冷空氣的外出，保證滅菌效果的內外一致性。
要保證蒸汽從菌袋的下方均勻向上，要留有蒸汽從滅菌物下方向四周擴散的空間。
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