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武漢原生原代生物醫藥科技有限公司

小鼠脾源性內皮祖細胞處理方法及細胞說明書

時間:2022-11-7 閱讀:280
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小鼠脾源性內皮祖細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理。

一.小鼠脾源性內皮祖細胞貼壁細胞
  客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
  肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
  顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
  嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
  將細胞培養瓶內的培養基用吸管完,全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
  用PBS2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
  1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。

二.小鼠脾源性內皮祖細胞懸浮細胞
  1.接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
  2.肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
  3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
  4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管完,全吸出(嚴禁直接傾倒)。
  5.1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2培養

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