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原代細胞的培養及應用了解下呢
原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養。因此,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養,此時的細胞保持原有細胞的基本性質,如果是正常細胞,仍然保留二倍體數。但實際上,通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。
常用的原代細胞的培養有組織塊培養和分散細胞培養。
組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上,加入培養基后進行培養。
分散細胞培養大致步驟為:
將動物組織從機體中取出離散成單個細胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。
原代細胞的基因表達分析能使研究者更好的理解生物學通路和疾病進程,如細胞周期規律,干細胞生物學,癌癥發展和神經紊亂等。原代細胞成為追求突破和更好療法的有力工具。
雖然原代細胞有諸多優點,但獲得高純度的原代細胞是一個艱巨的過程。比起細胞系,原代細胞可謂是極其敏感,需要額外添加經典培養基所沒有的營養。原代細胞要在專為每種細胞定制的特殊培養液中存活和生長。例如內皮細胞與上皮細胞或神經元的營養需求就大為不同,因此需要不同的特殊培養基。
優點
(1) 細胞剛離開機體,生物學性狀與原體內細胞比較接近,相比之下,細胞系的一個缺點是它們往往與原始的組織有不一樣的遺傳和表型,而原代細胞保持了細胞在體內的許多重要標志和功能。
(2) 細胞的初代培養也是建立各種細胞株(系)的必經階段。
應用:
1、為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;
2、為傳代培養創造條件;
3、服務于臨床實踐,用于藥物篩選等。