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范式洗滌劑法--木質纖維素測定標準方法

原理:
采用范式（Van Soest ）的洗滌纖維分析法測定中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）原理：
植物性飼料經中性洗滌劑煮沸處理，不溶解的殘渣為中性洗滌纖維，主要為細胞壁成分，其中包括板纖維素、纖維素、木質素和硅酸鹽。植物性飼料經酸性洗滌劑處理，剩余的殘渣為酸性洗滌纖維，其中包括纖維素、木質素和硅酸鹽。酸性洗滌纖維經72%硫酸處理后的殘渣為木質素和硅酸鹽，從酸性洗滌纖維值中減去72%硫酸處理后的殘渣為飼料的纖維素含量。將72%硫酸處理后的殘渣灰化，在灰化過程中逸出的部分為酸性洗滌木質素（SDL）的含量。
溶劑配制：
中性洗滌劑（3%十二烷基硫酸鈉）：準備稱取18.6g乙二胺四乙酸二鈉（EDTA，C10H14O8Na2.2H2O，分析純）和6.8g硼酸鈉（Na2B4O7.10H2O，分析純）放入燒杯中，加入少量蒸餾水，加入溶解后，再加入30g十二烷基硫酸鈉（C12H25NaO4S，分析純）和10ml乙二醇乙mi（C4H10O2,分析純）；再稱取4.56g污水磷酸氫二鈉（Na2HPO4，分析純）置于另一燒杯中，加入少量蒸餾水微微加熱溶解后，倒入前一個燒杯中，在容量瓶中稀釋至1000ml，其中PH值約為6.9-7.1（PH一般勿需調整）；1N硫酸：量取約27.87ml濃硫酸（分析純，比重1.84，98%），徐徐加入已裝有500ml蒸餾水的燒杯中，冷卻后注入1000ml容量瓶定容，標定；酸性洗滌劑（2%十六烷三甲基溴化銨）：稱取20g十六烷三甲基溴化銨（CTAB，分析純）溶于1000ml1N硫酸，必要時過濾；
操作步驟：
準確稱取1.0g樣品（通過40目篩）置于直筒燒杯中，加入100ml酸性洗滌劑和數滴十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉。將燒杯套上冷凝裝置于電爐上，在5-10min內煮沸，并持續保持微沸60min。趁熱用已知重量的玻璃坩堝抽濾，并用沸水反復沖洗玻璃坩堝及殘渣至濾液呈中性為止。用少量丙酮沖洗殘渣至抽下的丙酮液呈無色為主，并抽凈丙酮，將玻璃坩堝置于105度烘箱中烘2h后，在干燥器中冷卻30min稱重，直稱到恒重。
酸性洗滌木質素和酸不溶灰分（AIA）測定
將酸性洗滌纖維加入72%硫酸，在20度消化3h后過濾，并沖洗至中性。消化過程中溶解部分為纖維素，不溶解的殘渣為酸性洗滌木質素和酸不溶灰分，將殘渣烘干并灼燒灰化后即可得出酸洗洗滌木質素和酸不溶灰分的含量。

實驗步驟
1、 中性洗滌纖維測定
準確稱取1.0g樣品W（通過40目篩）置于直筒燒杯中，加入100ml中性洗滌劑和數滴十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉。
將燒杯套上冷凝裝置于電爐上，在5-10min內煮沸，并持續保持微沸60min。（注意加水保持刻度在100ml）
煮沸完畢后，取下直筒燒杯，趁熱用已知重量的玻璃坩堝W2進行抽濾，將燒杯中的殘渣全部移入，并用沸水沖洗玻璃坩堝與殘渣，直洗至濾液呈中性為止。
用20ml內酮沖洗二次，抽濾。
將玻璃坩堝置105度烘箱中烘2h后，在干燥器中冷卻30min稱重，直稱至恒重W1。
中性洗滌纖維含量的計算：NDF（%）=（W1-W2）/W*100

2、 酸性洗滌纖維測定
準確稱取1.0g樣品G（通過40目篩）置于直筒燒杯中，加入100ml酸性洗滌劑和數滴十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉。
將燒杯套上冷凝裝置于電爐上，在5-10min內煮沸，并持續保持微沸60min。趁熱用已知重量的玻璃坩堝G2抽濾，并用沸水反復沖洗玻璃坩堝及殘渣至濾液呈中性為止。
用少量丙酮沖洗殘渣至抽下的丙酮液呈無色為止，并拍凈丙酮。
將玻璃坩堝置于105度烘箱中烘2H后，在干燥器中冷卻30min稱重，直稱至恒重G1。
酸性洗滌纖維含量的計算：ADF（%）=（G1-G2）/G*100
半纖維素含量的計算：ADS（%）=NDF（%）-ADF（%）

3、 酸性洗滌木質素和酸不溶灰分（AIA）測定
把酸性洗滌纖維置于50ml燒杯中，加入5ml72%硫酸，20度水解3h，然后加水45ml，室溫過夜，次日用已稱恒重的3號砂芯漏斗H2過濾，水洗殘渣使濾液至PH6.5，于60度烘干，稱重H1。把剩余殘渣在馬弗爐中550度經2.5H灰化，測得灰分重量H3。
纖維素含量的計算：纖維素= ADF(%)-經72%硫酸處理后的殘渣（%） (H1-H2)/G*100
酸性洗滌木質素（ADL）含量的計算：ADF(%)=殘渣(%)-灰分（硅酸鹽，%）=(H1-H2-H3)/G*100



結果計算：
中性洗滌纖維含量的計算：NDF（%）=（W1-W2）/W*100
式中：
W1-----玻璃坩堝和NDF重（g）
W2-----玻璃坩堝重（g）
W---試樣重（g）

酸性洗滌纖維含量的計算：ADF（%）=（G1-G2）/G*100
式中：
G1----玻璃坩堝和A
DF重（g）
G2-----玻璃坩堝重（g）
G---試樣重（g）

半纖維素含量的計算：半纖維素%=NDF(%)-ADF(%)
纖維素含量的計算：纖維素= ADF(%)-經72%硫酸處理后的殘渣（%）
酸性洗滌木質素（ADL）含量的計算：ADF(%)=殘渣(%)-灰分（硅酸鹽，%）