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上海禾午生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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當(dāng)前位置:上海禾午生物科技有限公司>>質(zhì)粒菌株>>質(zhì)粒>> P70581pCMV-Clpp(rat)-3×FLAG-Neo

pCMV-Clpp(rat)-3×FLAG-Neo

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)P70581

品       牌禾午生物

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時(shí)間:2025-06-04 14:34:27瀏覽次數(shù):36次

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供貨周期 兩周 規(guī)格
貨號(hào) P70581 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
主要用途 僅供科研
名稱pCMV-Clpp(rat)-3×FLAG-Neo
別稱NM_001399287.1
質(zhì)粒宿主哺乳細(xì)胞
質(zhì)粒用途蛋白表達(dá)

名稱pCMV-Clpp(rat)-3×FLAG-Neo
別稱NM_001399287.1
基因長816bp
質(zhì)粒宿主哺乳細(xì)胞
質(zhì)粒用途蛋白表達(dá)
片段類型ORF
片段物種大鼠
原核抗性Amp
篩選標(biāo)記Neo/G418
啟動(dòng)子CMV
復(fù)制子pUC
感受態(tài)DH5a
溫度37度
背景載體pCMV-T7-MCS-3×FLAG-WPRE-Neo
正向引物CMV-F

 


注意事項(xiàng):轉(zhuǎn)化前請(qǐng)準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。


1
、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒,室溫放置1min;

2
、從-80冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標(biāo)記;

3
、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min;

4
42熱激90s,再冰浴2min;

5
、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;

6
、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7
、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8
、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;

9
、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒


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