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SNP-M179-小鼠椎間盤纖維環細胞
  • SNP-M179-小鼠椎間盤纖維環細胞
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貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢東湖高新區高新大道光谷生物

更新時間:2025-02-16 21:00:07

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尚恩生物依托國際化的*技術及多年專業化的原代細胞分離培養經驗,能夠為您提供高品質的原代細胞、原代細胞提取物定制服務。集結豐富經驗的人才,并配備了整套實驗設備,全程自主研發,嚴控開發流程,保障產品質量,緊抓售后服務,可以提供高質量的小鼠椎間盤纖維環細胞。已與國內外多家科研單位、藥企、以及醫院等建立了良好的合作關系,成為生物醫藥行業的誠信伙伴和堅強后盾。

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一、細胞基本屬性

貨號:SNP-M179

產品名稱:小鼠椎間盤纖維環細胞

物種:小鼠

組織來源:椎間盤組織

細胞簡介:該細胞分離自椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨復蓋于椎體上,下面骺環中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成,位于髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環的前側及兩側較厚,而后側較薄。纖維環的前部有強大的前縱韌帶,后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環細胞密度為9000個細胞/mm3,其外層的細胞呈梭型,主要屬于纖維細胞,內層細胞呈圓形,主要屬于軟骨細胞。在培養的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結構表現,它們的核較圓,核仁較明顯。細胞質內可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內質網和滑面內質網。細胞質內線粒體多,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質內有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒,纖維環細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,保證纖維環生理代謝活動所需的構造物質的供給。一但這種供給減少,纖維環的生物性能就會減弱,椎間盤開始退變。

方法簡介:采用膠原酶-中性蛋白酶聯合消化法并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:軟骨體系

發貨形式:T25瓶(1×106左右)

規格:5×10^5cells/T25瓶

培養條件:具體培養條件詳詢尚恩生物細胞培養技術專員

培養環境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠椎間盤纖維環細胞專用*培養基(產品貨號:SNPM-M179)作為體外培養的培養基。


二、細胞培養操作

換液周期2-3天
培養基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養瓶放入37度培養箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養基終止胰酶消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養瓶里;
8.補足*培養基,將培養瓶放回培養箱靜置培養;
注意事項不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存

注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案


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