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SNL-175-NB-4(人急性早幼粒白血病細(xì)胞)
  • SNL-175-NB-4(人急性早幼粒白血病細(xì)胞)
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貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢東湖高新區(qū)高新大道858號(hào)

更新時(shí)間:2025-01-16 21:00:07

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NB-4(人急性早幼粒白血病細(xì)胞)源自1989年第二次復(fù)發(fā)的急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL = AMLFAB M3)患者的骨髓。

一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱:NB-4(人急性早幼粒白血病細(xì)胞)
細(xì)胞別稱:NB-4; NB4; NB.4
細(xì)胞貨號(hào):SNL-175
細(xì)胞種屬:人
生長(zhǎng)情況:懸浮
培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定)
傳代方法:
1.混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,棄上清;
2.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
3.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項(xiàng):部分懸浮細(xì)胞會(huì)附著瓶底,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)基或者吹打細(xì)胞面就會(huì)脫落,不需要胰酶消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),更適合吹打細(xì)胞操作,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格:200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法:
1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項(xiàng):凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
Tips:
1.細(xì)胞懸浮圓形生長(zhǎng),小聚團(tuán)也有部分散開生長(zhǎng);
2.圓形透亮、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞,如果無法判斷,可以取少量細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色后計(jì)數(shù)確定細(xì)胞活率;
3.懸浮細(xì)胞密度維持1E5-5E5/ml之間,密度過低或者過高可能會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài);

我們推薦使用尚恩生物NB-4(人急性早幼粒白血病細(xì)胞)*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):SNLM-175)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

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