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如何繪制細胞生長曲線?

閱讀:2518      發(fā)布時間:2022-7-8
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1.實驗原理




典型的生長曲線即可分為潛伏期、指數(shù)生長期、平頂期及退化衰老四個部分,其中的三個不同生長時期(潛伏期、指數(shù)生長期和平頂期)是每個細胞系所共有的特征。通過測定生長曲線,不僅可以了解培養(yǎng)細胞生物學特性的基本參數(shù)、測定細胞絕對生長數(shù)、判斷細胞活力,而且也可用于測定藥物等外來因素對細胞生長的影響。本實驗采用計數(shù)法測定細胞生長曲線,通過連續(xù)對細胞計數(shù)(通常為10天,一般應每次計數(shù)3孔細胞取平均值),然后以存活細胞數(shù)對培養(yǎng)時間作圖,即得該種細胞的生長曲線。



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2.實驗材料


①小鼠胚胎成纖維細胞或雞胚成纖維細胞,DMEM*培養(yǎng)基。

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3.操作步驟


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① 細胞接種濃度不能過多也不能過少,在合適的濃度下細胞在7~10天內(nèi)能長滿而不發(fā)生生長抑制;細胞數(shù)量太少,細胞適應期太長;數(shù)量太多,細胞將很快進入增值穩(wěn)定期,在一段時間內(nèi)需進行傳代,曲線不能準確反映細胞生長情況。同種細胞的生長曲線先后測定要采用同一接種密度,這樣才能做縱向比較;不同的細胞也要接種細胞數(shù)相同,才能進行比較。


② 細胞生長曲線是觀察細胞生長基本規(guī)律的重要方法。只有具備自身穩(wěn)定性生長特性的細胞才適合在觀察細胞生長變化的實驗中應用。因而在細胞系細胞和非建系細胞生長特性觀察中,生長曲線的測定是最為基本的指標。


③ 細胞生長曲線雖然最為常用,但有時其反映數(shù)值不夠精確,有20% ~ 30%的誤差,需結合其他指標進行分析。在生長曲線上細胞數(shù)量增加1倍時間稱為細胞倍增時間,可以從曲線上換算出。細胞倍增的時間區(qū)間即為細胞對數(shù)生長期,細胞傳代、冷凍等實驗多應在此區(qū)間進行。


④ 細胞在不同培養(yǎng)液中的細胞生長曲線和細胞倍增時間可以直接反映細胞在該種培養(yǎng)液內(nèi)的增殖速度,是對培養(yǎng)液進行選擇的主要依據(jù)。通過個同培養(yǎng)液內(nèi)細胞生長曲線的差異,篩選出對成纖維細胞和上皮細胞適合的培養(yǎng)液。


⑤通過對細胞生長曲線的繪制,可比較不同的培養(yǎng)液對細胞生長曲線變化的影響。在條件允許的情況下,分析培養(yǎng)液中添加不同的生物活性物質(如生長因子、激素等)對細胞生長的影響,從而篩選出合適的細胞培養(yǎng)液。


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產(chǎn) 品 推 薦


【SNL-025】NIH/3T3(小鼠胚胎成纖維細胞)

【SNL-006】UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細胞)

【SNS-002】特級胎牛血清



公 司 簡 介

武漢尚恩生物技術有限公司坐落于武漢東湖區(qū)光谷生物城,專注于細胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務,公司建有標準化GMP實驗室、動物房,已整體通過ISO 9001:2015質量管理體系認證,獲得企業(yè)、3551人才、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項榮譽。  


公司主要研發(fā)生產(chǎn)細胞系、原代細胞、胎牛血清、基礎培養(yǎng)基、*培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品,提供細胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購;細胞庫凍存細胞系500余種,同時通過不間斷引種細胞擴大豐富細胞種類;公司還提供人源細胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務等。  


公司細胞業(yè)務覆蓋國內(nèi)各大高校生物實驗室、生物研究機構及一些生物科研、診斷、制藥公司,不斷為廣大科研工作者提供優(yōu)質的產(chǎn)品和服務!尚恩生物—您專業(yè)的細胞供應商!



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