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倒置熒光顯微鏡使用常見問題和解決方法介紹

閱讀:1329        發布時間:2023-12-6

倒置熒光顯微鏡是細胞培養、細胞轉染和很多生物研究中常用的儀器,相比共聚焦顯微鏡,倒置熒光顯微鏡的成像精度雖然稍低,但儀器更普及,更容易買到或者約到,而且使用維護都更簡單點。今天我們就給大家分享下倒置熒光顯微鏡使用可能遇到的常見問題,以及可能的解決辦法。

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什么是倒置熒光顯微鏡

倒置熒光顯微鏡由倒置顯微鏡和落射熒光模塊組成,倒置顯微鏡是相對正置顯微鏡的概念,其物鏡、照明系統相對樣品的位置是顛倒的;落射熒光模塊是熒光觀察的核心部件,有轉盤式熒光模塊和集成熒光模塊兩種,轉盤式后期可升級,但需要獨立的熒光光源燈箱,用轉盤式模塊的倒置熒光顯微鏡更大、更重、更貴。

 

為什么要用倒置熒光顯微鏡

倒置熒光顯微鏡通常Z高只會配40X物鏡,因此放大倍率、分辨率不如正置熒光顯微鏡,但勝在應用層面更方便好用。

 

一是、倒置熒光顯微鏡的物鏡有更長工具距離,可以適配各種培養皿從底部直接成像,從而節省了反復制樣做玻片的麻煩,效率更高更適合大批量、多視野培養細胞等樣品的觀察。

 

二是、倒置熒光顯微鏡可以無沾染觀察,無沾染意思是因為觀察無需打開培養皿,可避免取樣制樣帶來的沾染污染風險。

 

三是、倒置熒光顯微鏡的優勢是更大的工作空間,因為倒置熒光顯微的明場照明系統采用的是長工作距離聚光鏡,因此載物臺上方有更大空間,更方便安裝使用顯微操作系統等配件。

 

倒置熒光顯微鏡通常可以實現明場、相襯和熒光觀察,如果儀器附近有貼SOP或者說明書,可以看看,快速上手。明場觀察很簡單,可以看病理切片等樣品,這里不贅述;相襯觀察需要切換到相襯物鏡,然后把上光源光強調高,聚光鏡光闌調到PHP位置(最大位置),切換相襯環板到對應的位置即可;難點是熒光觀察,不同倒置熒光顯微鏡有不同結構,大致可以分為研究級倒置熒光顯微鏡和新型倒置熒光顯微鏡兩種。


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