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倒置金相顯微鏡的照明方法介紹

閱讀:804        發(fā)布時(shí)間:2023-6-28

倒置金相顯微鏡的照明方法按其照明光束的形成,可分為透射式照明",和落射式照明"兩大類。前者適用于透明或半透明的被檢物體,絕大數(shù)生物顯微鏡屬于此類照明法;后者則適用于非透明的被檢物體,光源來自上方,又稱反射式或落射式照明"。主要應(yīng)用與金相顯微鏡或熒光鏡檢法。  

1.透射式照明  

透射式照明法分中心照明和斜射照明兩種形式:  

1)中心照明:這是常用的透射式照明法,其特點(diǎn)是照明光束的中軸與倒置金相顯微鏡的光軸同在一條直線上。它又分為“臨界照明"和“柯勒照明"兩種。  

A.臨界照明(Criticalillumination):這是普通的照明法。這種照明的特點(diǎn)是光源經(jīng)聚光鏡后成像在被檢物體上,光束狹而強(qiáng),這是它的優(yōu)點(diǎn)。但是光源的燈絲像與被檢物體的平面重合,這樣就造成被檢物體的照明呈現(xiàn)出不均勻性,在有燈絲的部分則明亮;無燈絲的部分則暗淡,不僅影響成像的質(zhì)量,更不適合顯微照相,這是臨界照明的主要缺陷。其補(bǔ)救的方法是在光源的前方放置乳白和吸熱濾色片,使照明變得較為均勻和避免光源的長時(shí)間的照射而損傷被檢物體。  

B.柯勒照明:柯勒是十九世紀(jì)末蔡司廠的工程師,為了紀(jì)念他在光學(xué)領(lǐng)域的突出貢獻(xiàn),后人把他發(fā)明的二次成像叫做柯勒照明.柯勒照明克服了臨界照明的缺點(diǎn),是研究用倒置金相顯微鏡中的理想照明法。這中照明法不僅觀察效果佳,而且是成功地進(jìn)行顯微照相所需要的一種照明法。光源的燈絲經(jīng)聚光鏡及可變視場(chǎng)光闌后,燈絲像次落在聚光鏡孔徑的平面處,聚光鏡又將該處的后焦點(diǎn)平面處形成D二次的燈絲像。這樣在被檢物體的平面處沒有燈絲像的形成,不影響觀察。此外照明變得均勻。觀察時(shí),可改變聚光鏡孔徑光闌的大小,使光源充滿不同物鏡的入射光瞳,而使聚光鏡的數(shù)值孔徑與物鏡的數(shù)值孔徑匹配。同時(shí)聚光鏡又將視場(chǎng)光闌成像在被檢物體的平面處,改變視場(chǎng)光闌的大小可控制照明范圍。此外,這種照明的熱焦點(diǎn)不在被檢物體的平面處,即使長時(shí)間的照明,也不致?lián)p傷被檢物體。  

2)斜射照明:這種照明光束的中軸與倒置金相顯微鏡的光軸不在一直線上,而是與光軸形成一定的角度斜照在物體上,因此成斜射照明。相襯顯微術(shù)和暗視野顯微術(shù)就是斜射照明。  

2.反射式照明  

這種照明的光束來自物體的上方通過物鏡后射到被檢物體上,這樣物鏡又起著聚光鏡的作用。這種照明法是適用于非透明物體,如金屬,礦物等。

 


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