如何在液氮罐中進行細胞復蘇操作?
閱讀:1388 發布時間:2022-1-7
液氮罐俗稱液氮生物容器,是一種生物儲存容器,一般用于保存生物材料,像疫苗、細胞、動物精液之類。當打開液氮罐底部液體管道排放閥,液氮通過管道排出,經過罐體底部蒸發器進行汽化,這時汽化后的氣體進入罐體頂部,提供液氮的罐內壓力加壓,當液氮罐需要給外接供氣時,罐內的液體靠罐內壓力將液體壓出然后通過管道送到外界,液氮汽化后釋放出來,精液、細胞在充滿氮氣的環境下滿足低溫保存。
不同類型的液氮罐差異如下:
1.加氣輸液型液氮罐靠內部液氮產生汽化增大體積產生壓力讓液氮排出。
2.航空鋁液氮罐的蒸發量小,安全系數高。
3.不銹鋼小型液氮轉移杯,可以轉移少量樣品。
在低溫液氮的環境下,細胞能維持一定的活性,當取出的細胞要想恢復細胞活性就要進行細胞復蘇,如何利用液氮罐進行細胞復蘇操作呢?
1.取出凍存管后,直接放入37攝氏度的溫水中,不時搖晃讓其盡快融化。
2.取出的凍存管打開后使用吸管吸出細胞液,加到離心管滴加10倍以上的培養液混合均勻。
3.去除上清液,加入10%小牛血清培養液重懸細胞,調整細胞密度,在37攝氏度的培養箱中培養。
4.待第二天更換一次培養液,繼續培養。