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恒溫恒濕培養(yǎng)箱怎樣測定水中土壤菌群
許多客戶朋友關(guān)于恒溫恒濕培養(yǎng)箱是怎樣測定水中土壤菌群的不是很清楚，我們就來給我們做出了詳細的介紹，快來學習一下吧。
1、測定過程
水樣的搜集，用無菌采樣瓶搜集被測樣品，在采樣過程中，要保護瓶口和瓶頸，防止這些部分受雜菌污染。瓶內(nèi)要留下足夠的空間，以備測定之前搖晃。若搜集的水中有余氯，應于采樣前在無菌操作下于無菌采樣瓶中加人滅過菌的硫代硫酸鈉，加人量為每升水樣約0.1g。水樣搜集后應立即進行測定，如果2h內(nèi)不能進行測定，應把水樣放在冰箱中，于4℃~10℃保存，保存時間不宜逾越24h。經(jīng)冷凍保存后的水樣需測守時，從冰箱中取出于30℃左右活化4h~5h，再進行測定。
無菌箱(室)滅菌，把實驗所用的無菌稀釋水、無菌培養(yǎng)皿、無菌吸管等用品放人無菌箱(室)內(nèi)，翻開紫外線燈滅菌30min。水樣的稀釋和接種，關(guān)掉紫外線燈，翻開熒光燈，將待測水樣放人無菌箱(室)中，立即用百分之75的乙醇溶液浸泡的醫(yī)用脫脂棉球擦手，點著無菌箱(室)內(nèi)的酒精燈。
以下對水樣的稀釋和接種條的操作應在無菌箱(室)內(nèi)的火焰區(qū)進行。
挑選合適的稀釋度，應使后一個稀釋度接種后培養(yǎng)皿中成長的菌落數(shù)小于300個，在空白稀釋水樣瓶上標上稀釋度數(shù)。
另取一支5mL無菌吸管汲取5mL10-1水樣移人到di二個稀釋水中，充分搖勻，此時稀釋度為10~2，依次類推，直至需求的稀釋度停止。將不同稀釋度的水樣分別接種到無菌培養(yǎng)皿中，每個稀釋度重復接種3~5個皿，每皿接種1mL，接種時左手掌托住培養(yǎng)皿，大拇指和食指悄悄將培養(yǎng)皿提起，吸管與培養(yǎng)皿底成45°角相接。移開吸管時吸管不宜再碰到培養(yǎng)皿。接種時間不宜逾越4s。每接種一個稀釋度替換一支無菌吸管。另取一組培養(yǎng)皿不接水樣，作為空白。一起操作。將滅過菌的培養(yǎng)基冷卻至(45士1)℃，掀開培養(yǎng)皿蓋，將培養(yǎng)基灌入培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿應灌15mL~20mL。灌皿時不要使培養(yǎng)基直接灌在水樣上，灌皿后要將融化的培養(yǎng)基和皿中水樣*混合，小心勿使混合液濺到培養(yǎng)皿的邊沿，測定一個水樣從接種到灌皿不得逾越20min。
2、培養(yǎng)
待培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基固化后，倒置平皿，在恒溫恒濕培養(yǎng)箱中29℃培養(yǎng)72h。