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實驗室常用的20種限制性內切酶

時間:2024/4/25閱讀:901
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在分子生物學領域,限制性內切酶(Restriction Endonucleases)是一類重要的酶,能夠識別特定的DNA序列并在其特定位置切割雙鏈DNA,從而產生特定的DNA片段。這些酶被廣泛應用于DNA重組、基因克隆、PCR等實驗中。以下是20種常用的限制性內切酶及其相關應用介紹,以及在實驗中需要注意的事項。

限制性內切酶 AscI

 1. EcoRI

序列識別:GAATTC

應用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

注意事項:適宜的反應緩沖液和適當的溫度對反應效果至關重要。

 

 2. HindIII

序列識別:AAGCTT

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:應注意避免酶的過度消耗和不必要的環境污染。

 

 3. BamHI

序列識別:GGATCC

應用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

注意事項:反應條件的優化對保證酶的活性和特異性至關重要。

 

 4. XhoI

序列識別:CTCGAG

應用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

注意事項:應避免酶與RNA的結合,以免影響實驗結果。

 

 5. EcoRV

序列識別:GATATC

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:在反應中應嚴格控制酶的濃度,避免過度消耗。

 

 6. SalI

序列識別:GTCGAC

應用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

注意事項:酶的保存和使用條件對保持其活性至關重要。

 

 7. XbaI

序列識別:TCTAGA

應用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

注意事項:應避免酶的不必要凍融和長時間存放。

 

 8. PstI

序列識別:CTGCAG

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:應選擇適宜的反應緩沖液,以確保酶的最佳活性。

 

 9. SmaI

序列識別:CCCGGG

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:酶的反應條件需要在酶活性和DNA完整性之間取得平衡。

快速內切酶-agei內切酶EG23501-6

 10. NotI

序列識別:GCGGCCGC

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:應避免酶與DNA的過度反應,以免影響DNA片段的完整性。

 

 11. KpnI

序列識別:GGTACC

應用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

注意事項:反應體系中的離子濃度和pH值對酶的活性有重要影響,應予以嚴格控制。

 

 12. SacI

序列識別:GAGCTC

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:反應溫度和時間的選擇對酶的活性和特異性至關重要。

 

 13. SphI

序列識別:GCATGC

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:應避免酶與反應體系中的其他成分發生不必要的相互作用。

 

 14. EcoRII

序列識別:CCWGG

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:酶的保存和稀釋應避免超過其最佳活性濃度。

 

 15. BglII

序列識別:AGATCT

應用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

注意事項:反應體系中的酶和DNA的比例應適當控制,以避免浪費和不必要的反應。

 

 16. AvaI

序列識別:CYCGRG

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:反應體系中的離子濃度和溫度需要仔細控制,以確保酶的最佳活性。

 

 17. NdeI

序列識別:CATATG

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:酶的保存和凍融條件對其活性和穩定性至關重要。

快速內切酶-agei內切酶

 18. SstI

序列識別:GAGCTC

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:應選擇適宜的反應緩沖液和反應溫度,以保證酶的活性和特異性。

 

 19. BstEII

序列識別:GGTNACC

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:反應時間和酶的濃度需要進行優化,以獲得最佳的實驗結果。

 

 20. HpaI

序列識別:GTTAAC

應用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

注意事項:酶的穩定性受到環境條件的影響,應在適宜的溫度下保存和使用。

限制性內切酶在分子生物學實驗中很常用,其特異性識別和切割DNA序列的能力使其成為DNA重組、基因克隆和PCR等實驗的關鍵工具。然而,在使用限制性內切酶時,也需要注意一些重要事項,如優化反應條件、嚴格控制酶的濃度、避免酶的過度消耗和不必要的環境污染等,以確保實驗能夠順利進行并獲得可靠的結果。更多實驗室儀器,實驗耗材,科研試劑請進入蘇州阿爾法生物進行咨詢


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