1. 皮革水解蛋白含量檢測使用說明書

【簡介】

皮革粉就是將生產皮衣、皮箱、皮鞋、皮沙發、皮包等皮具時剩下的邊角料，經過化學處理后，水解出蛋白，再加一些香精、色素等原料而制得的皮革水解產物，由于動物的皮毛成分是蛋白質，因此皮革水解產物被稱為皮革水解蛋白。這種產品含有危害人體健康的重金屬六價鉻，不能用于食品加工。通過皮革水解提取氨基酸肽和氨基酸液，它是一種致癌物。不法分子將其添加到食品中的目的主要是提高蛋白質含量，通常將其摻入到生鮮乳中增加生鮮乳蛋白質的含量，但會改變生鮮乳的口感及氨基酸的組成，降低生鮮乳中氨基酸的吸收利用率，尤其“鞣革”下角廢料中含有的重金屬鉻，如果被人體吸收蓄積，可導致關節疏松、關節腫大、造成人體重金屬中毒。

皮革水解蛋白非法添加的主要對象為乳與乳制品、含乳飲料。它與三聚氰胺不同，三聚氰胺俗稱“蛋白精”，但并非真正的蛋白質，而皮革水解物是真正的蛋白質，若添加到食品當中，檢測起來難度更大。由于L-經脯氨酸是動物皮骨的膠原蛋白構成的特征氨基酸，通過水解可以將乳蛋白和其他動物皮骨的膠原蛋白區別開來，因此可以通過檢測—L-經脯氨酸含量來判斷是否有皮革水解蛋白。

【檢測原理】

通過對L(-)-羥脯氨酸含量的測定，可判定是否為動物水解蛋白。皮革水解蛋白中的羥脯氨酸經過提取，與檢測試劑反應生成有色化合物，用檢測儀測定其吸光度，在一定范圍內吸光度與含量成正比。

【檢測范圍】

乳制品等

【自備試劑】

氯化亞錫、濃鹽酸、對二甲氨基苯jia醛、高氯酸、異丙醇；

① 氯化亞錫溶ye：7.5g氯化亞錫溶液水中，再加入500ml濃鹽酸；

② 顯色劑：10g對二甲氨基苯jia醛，用35ml高氯酸溶解，加入65ml異丙醇。

【技術指標】

檢測下限：1mg/kg

【操作方法】

①樣品處理：準確稱取樣品2g放入250mL磨口三角瓶（自備）中。加幾粒沸石，加入氯化亞錫溶液100mL,置于水浴上加熱回流16h。趁熱將水解溶液過濾于200mL容量瓶中,用6moL/L熱鹽酸10mL反復三次沖洗三角瓶和濾紙,冷卻,用水定容到刻度,混勻。吸取5mL水解液于100mL燒杯中,用10mol/L、1mol/L氫氧化鈉溶液調節pH為8左右,過濾于250mL容量瓶中,用30mL水沖洗燒杯和濾紙上的氫氧化亞錫沉淀,反復三次,把洗液并入濾液中,以水洗至刻度,搖勻備用。

② 取兩支試管，試管1中加入2.0mL蒸餾水，試管2中加入2.0mL樣品處理溶液。

③ 分別向兩支試管中加入1.0 mL皮革水解蛋白檢測液A，搖勻后于室溫放置20min，再分別加入1.0 mL顯色劑，搖勻，塞上塞子于60℃水浴加熱20min后取出,迅速冷卻。將試管1倒入比色皿，將比色皿放入通道，按“對照測量”。 將試管2倒入比色皿，將比色皿放入通道中，按“樣品測量”。

【執行標準】

因L(-)-羥脯氨酸為膠原蛋白中的*組分，其含量占10%以上；而乳蛋白中不含有此成分，如若樣品中含有L(-)-羥脯氨酸，可判定添加了動物水解蛋白。

【注意事項】

① 所用的檢測液對皮膚均具有不同程度的傷害，使用時請做好防護。不慎沾到皮膚應立即插干并用大量水沖洗

② 檢測試劑需陰涼處避光保存，冰箱2~5℃保存最佳。

③ 上述檢測試劑為強腐蝕性，高危險試劑，需自行配制，配制過程請做好防護，例如佩戴防護手套等。