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微生物致病菌檢測儀-溶藻性弧菌檢測試劑盒操作說明書
【產品名稱】
溶藻性弧菌檢測試劑盒
【包裝規格】
16測試/盒 24測試/盒
【產品簡介】
本試劑盒基于公司科研團隊諸多創新性成果，針對快速檢測需求，實現在恒定溫度條件下的快速檢測，通過配套機器微生物致病菌檢測儀GY-PM17快速判讀結果。
【預期用途】
用于溶藻性弧菌快速檢測和篩查。
【產品特點】
1. 反應速度快，小于60 min。
2. 操作簡單，快速判讀。
3. 靈敏度高，本試劑盒zui低檢測限為5-10CFU/mL。
4. 特異性高，*的多重體系降低假陽性的出現。
【產品組成成分】
序號 名稱 規格 數量/支
1 Mixture Buffer 750μL 1
2 酶 100 μL 1
3 封閉劑 300μL 1
4 + 100 μL 1
【儲存條件及有效期】
-20℃條件下儲存，有效期為 12 個月，避免反復凍融。
【所需儀器及耗材】
微生物致病菌檢測儀GY-PM17、渦旋振蕩器、移液槍、吸頭、反應管。
【樣本要求】
本試劑盒適用于疑似溶藻性弧菌污染的樣品。
【使用指南】
1.樣品處理
建議使用配套的快速釋放劑系列產品進行模板制備，具體過程詳見產品說明書。提取后的上清液即為待測樣本，短期保存可放置于0-4℃，長期保存放置于-20℃，避免反復凍融。
2．樣本檢測
2.1 微生物致病菌檢測儀GY-PM17，啟動機器預熱待用，Mixture Buffer 自然解凍后渦旋混勻，瞬時離心待用。
2.2 剪取 n 個反應管（n=樣品數+1 陽性對照+1 陰性對照），反應體系配制如下：
試劑 體系配制
Mixture Buffer 44×（n+1）μL
酶 2.5×（n+1）μL
在一個新的 1.5 mL 離心管中加入上述試劑，渦旋混勻后瞬時離心。在每個反應管中加入 46μl混勻后的試劑，加入約10μl或黃Tip吸取一滴封閉劑進入反應管中。
2.3 在上述 n 個反應管中，按順序分別加入陰性對照 4 μl，待檢模板 4 μl，陽性對照 4 μl，每管所得反應總體積為50 μl，加樣時Tip需穿過封閉劑將模板加至反應管底部。蓋緊管蓋，瞬時離心。
2.4將準備好的反應管，放置到檢測設備中，按照檢測程序63℃檢測60min。
2.5反應結束后，將反應后試劑放置于zhi定位置及時處理，不可滅菌處理，不可打開管蓋。
3．結果判讀
反應前打開機器預熱達到預定溫度，將檢測管放入儀器后，點擊調零，點擊檢測，開始檢測。反應結束后，機器自動判讀，給出陽性或陰性結果，同時可點擊頁面上“圖譜"可觀察各孔光強變化曲線，對給出的結果進行驗證。實驗結果在陽性對照顯示“陽"，陰性對照顯示“陰"的情況下為有效實驗。顯示“陽"即該孔位樣本含有溶藻性弧菌，顯示為“陰"即該孔位樣本不含溶藻性弧菌。若陰、陽性對照反應管結果與上述情況不符，則本次檢測結果無效，應重新檢測或與產品公司聯系。
【注意事項及安全提示】
1. 使用本試劑盒前請仔細閱讀說明書。不同批號的產品請勿混合使用，避免反復凍融，請在有效期內使用試劑盒，由于操作不當引起的誤判，以及有此誤判引發的其他事項，本公司概不負責。
2. 檢測空間應嚴格分區操作，在空間條件允許情況下，試劑配置區用于配置反應所需要的所有試劑；樣品前處理區用于待測樣品的處理及加樣；擴增觀察區用于反應進行和結果判讀。各區內空間獨立，試驗用品專用，避免交叉污染。另外，樣品處理區建議配備超凈工作臺，所有步驟嚴格按照說明書的要求進行。
3.加樣時應盡量避免產生氣泡，反應前注意觀察反應管是否蓋緊，以免泄露，造成污染。實驗中所使用的離心管、Tip應保證無DNase及RNase。試劑盒內陽性對照應視為具有污染性物質，應避免污染其它樣本和反應試劑，導致錯誤檢測結果。
4. 檢測過程中建議穿潔凈工作服，帶一次性手套，使用的槍頭需提前滅菌。
5. 陽性對照可能會作為污染源，污染其他試劑和待檢樣品，導致出現假陽性結果，在加樣過程中建議最后加入陽性對照。
6. 上機前注意檢查反應管是否蓋緊，以免泄漏污染儀器。在反應結束后切忌開蓋，以防氣溶膠污染。
7. 試劑盒使用完畢廢棄時按照廢棄物相關規定處理，由使用者自行負責處理。
8. 工作臺及各物品定期用 1%次氯酸鈉、75%酒精或紫外燈處理。