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HPLC的常用數(shù)據(jù)處理方法

閱讀:3273      發(fā)布時間:2022-8-8
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   液相色譜儀的儀器本身是記錄樣品通過檢測器時,吸光度的變化而產(chǎn)生的電信號變化,從而產(chǎn)生色譜譜圖,后面的結(jié)果就要靠后期的色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。

    譜圖處理完即可制作校正曲線,校正曲線是數(shù)據(jù)處理的重點,是將標樣譜圖的信息與數(shù)據(jù)做成一個標準,供處理試樣譜圖使用。校正是通過分析準備好的標準樣品,來確定計算組分濃度的響應(yīng)因子的過程。接下來介紹常用的數(shù)據(jù)處理方法:

 

外標法
 
       外標法是指添加一定量的標準品于空白樣品中制成對照樣品,與未知檢測樣品平行進行樣品處理并檢測,根據(jù)對照品響應(yīng)值與標準品的濃度函數(shù)關(guān)系計算出未知檢測樣品中被測組分濃度的定量方法。
                                                                 內(nèi)標法 
      內(nèi)標法指的是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標物加到一定量的被測樣品混合物中,然后對含有內(nèi)標物的樣品進行色譜分析,分別測定內(nèi)標物和待測組分的峰面積及相對校正因子,按公式計算出被測組分的含量。

 

兩種數(shù)據(jù)處理方法的區(qū)別

 

      內(nèi)標法是把標準物質(zhì)加入到被測樣品中,外標法不是把標準物質(zhì)加入到被測樣品中,而是在與被測樣品相同的色譜條件下單獨測定。
1、外標法要求儀器重復(fù)性很嚴格,適于大量的分析樣品,因為儀器隨著使用會有所變化,因此需要定期進行曲線校正。此法的特點是操作簡單,計算方便,不需測量校正因子,適于自動分析。但儀器的重現(xiàn)性和操作條件的穩(wěn)定性必須保證,否則,會影響實驗結(jié)果。
2、內(nèi)標法要求挺嚴格的,對于內(nèi)標物的選擇要有一定的原則,適于分析樣品量較少的情況;不要求樣品里的所有組分都出峰,只要內(nèi)標物和所關(guān)注的組分出峰并分離好就可以了;定量準確,對進樣量和操作條件的控制不很嚴格,但必須準確稱量試樣和內(nèi)標物,否則會影響實驗結(jié)果·。


                                                                                              本文內(nèi)容轉(zhuǎn)載自食品伙伴網(wǎng)《HPLC的常用數(shù)據(jù)處理方法》

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