將C18 固定相稱為用的最多的化學物質之一可能更合適。在色譜柱供應商中，這一階段的不斷增長的品種肯定不少。然而，在我們深入研究手頭的主題之前，這里簡要回顧一下 C18 固定相是如何產生的。
一、反相色譜
隨著更多科學家參與反相色譜該領域，色譜中引入了額外的分離模式，以分離和純化許多不同基質中的多種化合物。在色譜中，首先從色譜柱中洗脫的是離子型和強極性分析物，疏水性更強的分析物其次。與 Tsvet 的實驗相比，這些化合物以相反的順序洗脫。因此，該系統被稱為“反相”色譜。
RP 技術的最終目標是分離具有不同疏水程度的分析物。簡而言之，此任務通過以下方式完成：
1、通過疏水固定相來保留分析物。
修改和優化具有不同能力的多組分溶劑系統，作為目標分析物的良好溶劑。這包括有機溶劑和緩沖溶液（如果適用）。并非所有化合物都是強酸性或強堿性，而是可能具有需要窄 pH 范圍來控制其行為的極性基團。恒譜生反相色譜柱具有很廣泛的 PH 適用范圍， 在 PH 條件下非常耐用。對于低 PH 應用，在 pH 1.8 的 條件下連續進樣 1500 次的實驗表明該液相色譜柱具有良好的穩定性和重現性。
碳氫化合物是疏水性的例子，實際上是油性物質。更具體地說，直鏈烷烴非常適合用作良好的固定相。我們應該注意到，隨著鏈中碳原子的增加，碳氫化合物的物理性質也會發生變化——C1 到 C4 是氣態的；C5-C17 是液體；C18 和更大的是固體。除了烷烴之外，還有其他候選物，例如芳烴和環狀烷烴，在這里也可以作為固定相使用。C18 的流行可能是由于用于鍵合工藝的起始材料的早期可用性。這個幸運的巧合導致進一步發現 C18非常適合色譜過程，無論哪種方式。恒譜生的c18色譜柱被廣泛應用各種化合物分析，是客戶使用廣泛的產品之一。
2、將烷烴基團，特別是 C18 或十八烷基，連接到合適的表面上。二氧化硅的性能優于所考慮的所有其他介質，二氧化硅顆粒有多種形狀（規則球形或不規則）、尺寸（0.9 o 10 µm 或更大）、孔隙率（大至 1000 Å），并且是全多孔或在設計上具有堅實的核心。
3、鍵合過程完成后，C18 配體在分子水平上附著在二氧化硅上，并在二氧化硅顆粒孔內進行更通用的物理放置。
4、 C18 固定相的優點和簡單性在于它提供了非常簡單的疏水相互作用。當流動相中的溶質穿過二氧化硅孔時，它們可以通過相當弱的疏水相互作用被烴類吸引和保持。
5、在一般實踐中，恒譜生建議將流動 pH 設置為分別高于或低于 pK b或 pK a 2 個單位，以確保化合物以一種最有可能保留在色譜柱上的形式存在。當然，幾乎所有事情和每條規則都有例外。
至此，我們只介紹了流動相的一種成分，特別是水性部分。這導致我們使用多種化學特性來幫助提高分析物在 C18 固定相上的保留。
總之，C18 是可用于反相色譜的簡單、方便的固定相之一。
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