使用高效液相色譜（HPLC）分析樣品廣泛應(yīng)用于藥物成分分析、食品添加劑測定和環(huán)境樣品測試是目前普遍的一個方法。由于液相色譜柱在許多實驗室中是核心設(shè)備且價格昂貴，因此保護(hù)其免受損壞是延長色譜柱壽命和降低成本的首要考慮因素。維護(hù)良好的色譜柱還可產(chǎn)生一致、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，支持可靠的分析結(jié)果。
1.如何提高色譜柱的性能？
色譜柱性能取決于許多因素，包括樣品特性、不溶性顆粒的存在以及使用后的清潔和維護(hù)。然而，并非所有的實驗條件在使用期間都是理想的。例如，一些樣品具有苛刻但必要的pH條件。因此，液體分析柱的預(yù)防性維護(hù)程序有助于最大限度地延長色譜柱壽命并保持HPLC效率。
2.哪些因素會影響色譜柱壽命？
常見的HPLC問題包括柱背壓增加、泄漏和無法保持一致的流速。未過濾樣品或流動相中的顆粒會導(dǎo)致這些問題，任何進(jìn)入HPLC系統(tǒng)的物質(zhì)都有可能將顆粒物質(zhì)引入色譜柱基質(zhì)，從而縮短色譜柱的使用壽命。因此，樣品必須經(jīng)過預(yù)處理，使用前也需要用溶劑過濾器過濾流動相。
流動相的過濾和脫氣將去除微粒和溶解氣體，確保它們不會到達(dá)并損壞色譜柱。如果流動相含有來自溶解固體材料的緩沖鹽或改性劑，則過濾尤其重要。泵低壓進(jìn)口側(cè)使用的恒譜生HPLC溶劑進(jìn)口過濾器有助于保護(hù)止回閥、進(jìn)樣器和色譜柱免受有害顆粒污染物的影響。將此步驟添加到例程中可以幫助減少色譜圖中的基線噪聲。
使用在線過濾器和保護(hù)柱也有助于防止顆粒進(jìn)入系統(tǒng)和護(hù)柱。色譜柱是液相系統(tǒng)中的一個關(guān)鍵組件，這些色譜柱保護(hù)器的使用取決于應(yīng)用，需要一個或兩個。恒譜生的色譜保護(hù)柱是一種短柱，樣品和流動相在進(jìn)入主柱之前通過該柱，有助于在到達(dá)分析柱之前去除雜質(zhì)和懸浮固體。保護(hù)柱的使用取決于具體應(yīng)用，當(dāng)色譜行為發(fā)生變化時，如背壓、保留時間或峰加寬的變化，需要定期更換。
實驗中還需要考慮樣品和流動相的兼容性，因為一些樣品組分會與某些溶劑發(fā)生反應(yīng)。例如，醛和酮與氨基流動相反應(yīng)。避免反應(yīng)性組合有助于保護(hù)色譜柱免受損壞。
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