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技術文章

世聯博研腎纖維化小鼠模型實驗技術服務介紹

閱讀:156          發布時間:2024-6-27

腎纖維化(RF)小鼠模型




腎積水是指尿液充腎盂排出受阻,蓄積后腎內壓力增高,腎盂腎盞擴張,腎實質未縮,導致腎功能減退。梗阻性腎病其主要病理生理改變是腎積水、腎盂及腎小管壓力升高、腎間質水腫、炎性細胞浸潤、腎間質內成纖維細胞增生、腎間質膠原蛋白聚集、腎間質增寬、腎小管未縮,最終導致腎間質纖維化和腎單位減少,引起腎功能衰竭。




動物品系:SPF級Balb/C小鼠,雄性,周齡為8w-10w,體重為30g-35g


實驗分六組:空白對照組、模型組、陽性藥物組、受試藥物低、中、高劑量組


實驗周期:7d,14d,21d,28d


造模方法:


1. 小鼠3%戊ba比妥鈉80mg/kg腹腔麻醉后側臥,左側背部脫毛


2. 在大腿上方脊椎左側1cm處開口,剪開皮膚及肌肉,


3. 分離出左側輸尿管,在其上1/3處游離輸尿管,6號線結扎2道,在其間剪斷輸尿管,清理傷口后分兩層縫合,待小鼠清醒后,將其放回潔凈籠具后放回飼養室飼養,定期觀察小鼠狀態及死亡情況并做好記錄。


4. 在模型建立后7d,14d,21d,28d分別處死小鼠,取左側部分腎組織于4%多聚甲醛溶液固定,石蠟包埋;其余腎組織液氮冷凍,-80度保存。


取組織做HE染色及Masson染色,光鏡觀察腎小球、腎小管-間質的病理變化及炎性細胞浸潤情況。


可見模型組小鼠的腎間質出現炎癥細胞浸潤,腎小管上皮細胞未縮、刷狀緣消失、腎小管管腔擴張呈囊狀,管腔塌陷,間質明顯增寬,間質內可見大量炎性細胞浸潤,伴有較多的成纖維細胞增生。并隨時間的延長炎癥細胞浸潤加重,小管上皮細胞扁平、脫落,腎小管未縮、擴張加重,甚至塌陷、消失,膠原纖維增生,間質纖維化加重 。


(造模方式僅供參考,具體以實驗操作為準)


注意事項:


1.分離輸尿管時注意不要損傷腎臟


2.注意清理傷口,防止感染


3.取下腎臟后要剝離腎表面的結締組織薄膜



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