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人舌磷癌細胞概述

閱讀:710      發布時間:2023-9-7
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人舌磷癌細胞


培養基

CAL33細胞專用培養基:89%EMEM+10%FBS+1%GlutaMAX-1(2mM)

傳代方法

復蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內全部溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL全培養基的離心管內,1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL全培養基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL全培養基的T25瓶中,放入培養箱培養。
細胞傳代:①將舊培養液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,即消化完成,否則繼續消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL全培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當的全培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。;④注意培養基pH值變化和細胞密度,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%-90%時,重復傳代操作或者凍存。

生長條件

培養溫度37℃;氣體環境5%CO2+95%空氣;

生長特性

貼壁生長

存儲條件

液氮

安全等級

0

形態

上皮細胞樣,多角形,邊緣不規則,單層貼壁生長



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