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上海牧榮生物科技有限公司

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101bio細(xì)胞永生化試劑盒手冊(cè)

閱讀:562      發(fā)布時(shí)間:2024-03-07
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該試劑可將大多數(shù)細(xì)胞中慢病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)率提高10倍。它是針對(duì)慢病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒感染大多數(shù)細(xì)胞而優(yōu)化的聚合物混合物。以 500x 溶液形式提供,足以在 24 孔板中進(jìn)行 100 次轉(zhuǎn)導(dǎo)。它用于逆轉(zhuǎn)錄病毒或慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)

規(guī)格:100 µl (PV100) 或 500 µl (PV500) 

運(yùn)輸:環(huán)境溫度 

儲(chǔ)存:本產(chǎn)品在 4 °C 下可穩(wěn)定保存 3 個(gè)月,在 -20 °C 下可穩(wěn)定保存 6 個(gè)月。

質(zhì)量控制:每批病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑均經(jīng)過(guò)無(wú)菌測(cè)試,并成功提高病毒顆粒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。該套件僅供研究使用。不適用于診斷或治療過(guò)程。

方案 

1. 第 1 天,在 24 孔板的細(xì)胞培養(yǎng)基中每孔接種 50,000 個(gè)細(xì)胞。

 2. 第 2 天細(xì)胞應(yīng)達(dá)到 50% 至 70% 匯合度。 

3. 吸出細(xì)胞中的培養(yǎng)基。 

4. 將培養(yǎng)基與病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑混合至 1X 終濃度。例如:將 1 µl 增強(qiáng)劑添加到 500 µl 培養(yǎng)基中,然后轉(zhuǎn)移到每個(gè)孔中。 

5. 將病毒添加到每個(gè)孔中并搖動(dòng)板以充分混合。可選:以不同的 MOI(5、10 和 20 等)將病毒添加到不同的孔中,以優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)。 

6. 在第 5 天,即轉(zhuǎn)導(dǎo)后約 72 小時(shí),如果病毒構(gòu)建體具有 GFP 等報(bào)告基因,則檢查細(xì)胞的報(bào)告基因表達(dá)情況。 

7. 吸出培養(yǎng)基。用 PBS 清洗細(xì)胞。 

8. 在每個(gè)孔中添加 100 µl 裂解緩沖液。 

9. 根據(jù)滴定試劑盒給出的方案滴定病毒。

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上海牧榮生物科技有限公司

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