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選擇固相萃取柱之前一定要先了解下這些知識

時間:2022-8-12閱讀:829

固相萃取是建立在傳統(tǒng)的液液萃取基礎(chǔ)上,填料為一般硅膠基鍵合固定相,基于spe固體填料與樣品中的目標(biāo)化合物產(chǎn)生各種作用力,將目標(biāo)物與樣品基質(zhì)分離,再用洗脫液洗脫,達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。固相萃取是一種純化提取物,改善結(jié)果準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性的快速而經(jīng)濟(jì)的技術(shù)。

1.固相萃取分類及萃取柱填料選取

根據(jù)分離模式不同,固相萃取可分為正相、反相、離子交換、混合機(jī)理分離模式。

(1)反相固相萃取

填料硅膠表面的親水硅醇基通過硅烷化學(xué)反應(yīng),鍵合非極性烷基或芳香基、聚合物等材料作為反相固定相,被測物的碳?xì)滏I與固定相表面官能團(tuán)產(chǎn)生非極性的范德華力或色散力,使得極性溶劑中的非極性以及弱極性的物質(zhì)保留在固定相上,達(dá)到凈化、富集樣品的目的。

反相固相萃取萃取柱填料一般有以下幾種:C18、C8、C4、CN、Ph。

(2)正相固相萃取

正相固相萃取利用被測物的極性官能團(tuán)與填料表面的極性官能團(tuán)通過氫鍵、π-π鍵間、偶極-偶極和偶極-誘導(dǎo)偶極相的相互作用力保留溶于非極性介質(zhì)中的極性物質(zhì),常用極性溶劑作為洗脫液。反相固相萃取萃取柱填料一般有以下幾種:極性官能團(tuán)鍵合硅膠(如 CN、NH2、二醇基)和極性吸附物質(zhì)(Al2O3、硅、硅酸鎂、活性炭等)

(3)離子交換固相萃取

根據(jù)被測物的帶電荷基團(tuán)與鍵合硅膠上的帶電荷基團(tuán)相互靜電吸引實現(xiàn)吸附分離。離子交換分為陰離子(WAX、SAX)和陽離子(WCX、SCX)交換,陽離子填料通常用硅膠上鍵合磺酸鈉鹽、碳酸鈉鹽等作為陽離子交換固定相,陰離子常用脂肪族季銨鹽、氨基鍵合作為固定相,離子型化合物在柱中的保留與洗脫與其pH、離子強(qiáng)度和反離子強(qiáng)度有關(guān),對于酸性分析物在離子交換柱中保留時,樣品溶液pH要比其pKa大2個單位,并有低的離子強(qiáng)度,處于離子狀態(tài)的目標(biāo)物才能靠靜電吸引到鍵合填料中,在洗脫該藥物時,洗脫液pH應(yīng)小于其pKa 2個單位或加入高離子強(qiáng)度溶液,分析物才能被洗脫。堿性分析物則相反。

(4)混合型固相萃取

隨著固相萃取技術(shù)的發(fā)展,多種萃取模式相結(jié)合的固相萃取柱也漸漸被商品化,為了實現(xiàn)多殘留同時檢測,混合型固相萃取柱為多殘留技術(shù)的研究提供了有利的工具。

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