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無血清哺乳動物細胞培養基為什么普遍要添加胰島素

時間:2024/10/12閱讀:275
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胰島素是由胰島β細胞分泌的一種多肽激素。胰島素在許多細胞活動中發揮重要作用:如促進糖和氨基酸轉運,提高合成代謝降低分解代謝,刺激細胞生長等。重組人胰島素(rhInsulin)系由含有高效表達人胰島素基因的酵母表達系統經發酵、分離和高度純化后經凍干制成。由兩條多肽鏈組成,每條多肽鏈由51個氨基酸殘基組成多肽鏈,分子量為5807Da。


胰島素是無血清哺乳動物細胞培養基中的普遍添加物質,上海惠誠生物提供的重組人胰島素Recombinant Insulin(Cat NO.:GMP-045)屬于GMP級別,可提供g級和kg級包裝。

胰島素GMP-045.jpg

胰島素在細胞培養時的作用

胰島素作用廣泛,包括調節脂肪和蛋白質的代謝以及促進細胞生長等。胰島素功能的發揮源于其對細胞的作用,進而引起組織乃至機體的整體反應。一般可將胰島素在細胞水平的作用分為三大類:代謝作用、促生長作用、以及代謝和促生長混合作用。

胰島素在哺乳動物細胞培養中的作用主要是通過結合和激活IGF-1R。胰島素和相關的胰島素樣生長因子IGF-i和IGF-ii通過結合胰島素受體(IR)和1型IGF受體(IGF-1r)作用于細胞,在哺乳動物細胞表面表達。胰島素只有在生理濃度下才能激活IR;高濃度的胰島素通過IGF-1R觸發有絲分裂效應,并通過天然IR導致各種效應。胰島素通常以每升1到10mg的濃度添加到細胞培養基中,這大約是生理濃度的100倍。


從生理上講,胰島素的作用主要是代謝,而IGF主要是生長因子。重組胰島素以大約100倍的生理濃度添加到哺乳動物細胞培養物中,作為生長因子,具有抗凋亡和有絲分裂作用。

在無血清細胞培養液中,常添加胰島素來維持細胞生長,調節細胞對葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的攝取、利用和貯存,同時抑制糖原、蛋白質和脂肪的分解。


使用說明:

建議將凍干重組人胰島素溶解在無菌0.01M鹽酸中,濃度不低于1mg/ml,以待進一步稀釋至工作濃度。盡可能避免反復凍融。 復溶后的重組人胰島素:4℃可穩定儲存7-10天;長期保存請分裝后存放于-80℃。


胰島素產品優勢如下:

1)GMP級生產管理規范

2)技術全線技術支持

3) 無血清無動物源級別

4) 純度高\生物活性高

5) 蛋白含量經過檢測驗證

6)監控內毒素


胰島素在體外培養細胞的作用:

胰島素在許多細胞活動中發揮重要作用,是哺乳動物細胞培養基中常用的添加物質胰島素能加速葡萄糖的利用和抑制葡萄糖的生成,抑制脂肪的分解,促進脂肪的合成和貯存,促進蛋白質的合成,阻止蛋白質的分解,促進鉀離子和鎂離子穿過細胞膜進入細胞內;促進脫氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)及三磷酸腺苷(ATP)的合成。


結合胰島素在細胞里的作用,它可以降低蛋白降解;降低脂肪降解;增加氨基酸的攝入;增加鉀元素的攝入;增加葡萄糖的攝入,就是葡萄糖進入細胞,提供能量什么的.所以總體來說就是保持細胞的活性。


胰島素主要作用在肝臟、肌肉及脂肪組織,控制著蛋白質、糖、脂肪三大營養物質的代謝和貯存。

(1)對糖代謝的影響。能加速葡萄糖的利用和抑制葡萄糖的生成,即使血糖的去路增加而來源減少,于是血糖降低。

①加速葡萄糖的利用。胰島素能提高細胞膜對葡萄糖的通透性,促進葡萄糖由細胞外轉運到細胞內,為組織利用糖提供有利條件,又能促進葡萄糖激酶(肝內) 和己糖激酶(肝外)的活性,促進葡萄糖轉變為6磷酸葡萄糖,從而加速葡萄糖的酵解和氧化;并在糖元合成酶作用下促進肝糖元和肌糖元的合成和貯存。

②抑制葡萄糖的生成,能抑制肝糖元分解為葡萄糖,以及抑制甘油、乳酸和氨基酸轉變為糖元,減少糖元的異生。

(2)對脂肪代謝的影響。促進脂肪的合成和貯存,抑制脂肪的分解。糖尿病時糖代謝障礙,脂肪大量動員,產生大量游離脂肪酸在肝臟氧化至乙酰輔酶A,然后變為酮體,若酮體產生過多則出現酮血癥。胰島素能抑制脂肪分解,并促進糖的利用,從而抑制酮體產生,糾正酮血癥。

(3)對蛋白質代謝的影響。促進蛋白質的合成,阻止蛋白質的分解。

(4)胰島素可促進鉀離子和鎂離子穿過細胞膜進入細胞內;可促進脫氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)及三磷酸腺苷(ATP)的合成。

另外,葡萄糖在紅細胞及腦細胞膜的進出,葡萄糖在腎小管的重吸收以及小腸粘膜上皮細胞對葡萄糖的吸收,都不受胰島素的影響。胰島素作用的靶細胞主要有肝細胞、脂肪細胞、肌肉細胞、血細胞、肺臟和腎臟的細胞、睪丸細胞等。


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