HTRF(均質(zhì)時(shí)間分辨熒光)是一種免洗技術(shù)，用來檢測(cè)純液相體系中待測(cè)物，是一款高通量藥物篩選利器。。它將標(biāo)準(zhǔn)熒光共振能量轉(zhuǎn)移FRET技術(shù)與時(shí)間分辨熒光TRF測(cè)量相結(jié)合，消除了短暫的背景熒光。對(duì)于夾心試驗(yàn)，使用兩種識(shí)別感興趣蛋白質(zhì)的抗體，其中一種抗體與供體結(jié)合，另一種與受體結(jié)合。如果2個(gè)抗體識(shí)別分析物，供體激發(fā)時(shí)會(huì)發(fā)出熒光，能量會(huì)轉(zhuǎn)移到附近的受體，從而產(chǎn)生特定的受體熒光。供體熒光也被測(cè)量，并與受體熒光的比率被應(yīng)用。

HTRF技術(shù)測(cè)定如何工作？

HTRF只需要幾個(gè)步驟:

1. 將分析物或樣品添加到微孔板中；

2. 添加檢測(cè)試劑：抗分析物偶聯(lián)供體和受體偶聯(lián)抗體；

3. 孵育2小時(shí)(某些化驗(yàn)可達(dá)一夜)；

4. 在HTRF兼容或認(rèn)證的微孔板閱讀器上讀取該分析。由受體發(fā)出的光將與相互作用的水平成比例。
   

HTRF技術(shù)優(yōu)勢(shì):

1.操作簡單：空板直接加樣;加完即可檢測(cè);時(shí)間短加樣和孵育2h；

2.適合珍貴樣本：整個(gè)實(shí)驗(yàn)體系只需20ul；

3.均相檢測(cè)：無需包被;免洗 ELISA;省時(shí)省力；

4.體系穩(wěn)定：7天內(nèi)可隨時(shí)檢測(cè);信號(hào)基本不變；

5.數(shù)據(jù)客觀真實(shí)：比值處理可有效去除背景熒光；假陽性率和價(jià)陰性率低；

6.高(空格)端檢測(cè)：只需簡單的酶標(biāo)儀就可以輕松搞定。

應(yīng)用：

HTRF已被證明在各種應(yīng)用中，包括GPCRs，激酶，表觀遺傳學(xué)，PPIs和包括細(xì)胞因子在內(nèi)的廣泛生物標(biāo)志物的量化。

上海惠誠生物提供Cisbio超過350個(gè)即用試劑盒，包含您需要的一切，并利用這個(gè)簡單的解決方案，節(jié)省您的時(shí)間和金錢?？焖?，均質(zhì)，易于使用和自動(dòng)化，允許極度小型化和易于檢測(cè)開發(fā)。近年來，HTRF已成為時(shí)間分辨FRET的黃金參考。