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上海惠誠生物科技有限公司
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瓊脂糖預染預制膠電泳試劑盒使用中可能出現的問題上?;菡\生物專業解答

時間:2022/5/30閱讀:385
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瓊脂糖預染預制膠電泳試劑盒使用過程中可能出現一些問題,比如:如何選擇預制膠濃度,選擇什么體系,Marker條帶電泳清晰但樣品電泳很差,回收低,掛孔和圖像不好等原因,惠誠生物針對推出的該款預制膠進行解答。

 

1、如何選擇預制膠濃度?

不同分子量對應的預制膠濃度,實驗情況很復雜,下表僅供參考:

圖片

2、能不能使用其他體系?

目前這款預制膠使用體系為TAE,不能在其他體系(如TBE/TPE)的電泳液中電泳;

 

3、Marker條帶電泳清晰,樣品電泳很差?

一般情況是樣本的問題,因為膠只是一個平臺,不改變核酸的結構和形態,具體解決方案如下:

A、調整電壓(一般降低);B、減少上樣量或者稀釋;C、用新的制備樣品;D、調整PCR 的條件(如退火溫度)等等。

 

4、為什么回收低?

若回收低,需要調高熔膠溫度和延長熔膠時間,具體原因如下:

A、膠是0.7cm 厚的標準膠,比用戶自配的膠在切膠的位置厚很多,因此在切膠的過程中切的膠要比自配的膠多;

B、膠孔比用戶原來自己的孔寬一點點,用戶在切膠的過程中也會比自配的膠切的多。

這樣的話,用戶使用他們原來的習慣,在相同的時間膠沒有*熔掉,回收量就會少很多。

 

5、出現掛孔的原因?

用戶在電泳液外面點樣,樣品因為沒有電泳液保護,會很快擴散到膠里,有可能形成掛孔。

 

6、圖形不好怎么辦?

預制膠因為在低溫時間長,電泳時較好比客戶經常使用的電壓低一些,調低20-40伏特左右,會得到比較好的圖形。

 

7、電泳是一個系統,任何原料都可能引起變化,任何改變也需要調整。根據實際需求,選擇*優方案。

 

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