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從*了解液相

閱讀:3794        發布時間:2020-5-3

HPLC的全稱是:
高效液相色譜
High Performance Liquid Chromatography其中,Chromatography的詞根Chrom在古希臘語中是顏色的意思,而我們色譜學堂,ChromClass也同樣使用了Chrom這個詞根。
色譜的本意是印有標準顏色和名稱的色表,但是一種化學分析的方法怎么會得到這樣的名字呢?這得從色譜技術的起源說起。
100多年前,德國科學家費德里希描述了采用濾紙來進行定性分析,進而在1906年,e國的植物學家茨維特利用碳酸鈣作為基質,石油醚作為流動相成功分離了葉綠素和胡蘿卜素。它們分離后呈現出不同顏色的條帶,因此茨維特把這種分離技術取名為色譜。
現代的色譜技術有很多種,經常用的是氣相色譜和液相色譜。其中,氣相是通過溫度和載氣的作用將樣品變為氣態,在色譜柱中運動起來。但有的樣品沸點太高,或者加熱就分解,氣相就不合適了。這時候,可以選擇用液相色譜來分析。
結構
液相色譜一般由四個部分組成,分別是:
左右滑動查看HPLC結構
泵,把流動相連續、穩定的注入系統,提供穩定的推動力。

進樣器,負責把液體樣品引入系統。

色譜柱,樣品在其上實現分離。
檢測器,負責檢測從色譜柱出來的樣品。
分離過程
氣相色譜的推動力來自于載氣,而液相色譜的樣品是被流動相溶解和推動的。
對于氣相來說,載氣只有氮氣,氦氣,氫氣等有限的幾種。
而在液相中,流動相可以有很多選擇,并且不同種類,不同pH值,不同比例等等對分析的效果也會有很大影響。
樣品通過進樣器進樣,可以選擇手動進樣,或者自動進樣,根據方法需要,還可以使用控溫的自動進樣器得到更加穩定的結果。
接著,流動相帶動著樣品進入色譜柱。
色譜柱是液相分離的核心,通常來說,越長的柱子意味著越高的柱效,越短的柱子意味著越快的分離,直徑越大意味著更大的容量,直徑越小靈敏度越高。
樣品在色譜柱中分離之后,進入檢測器,將化學信號轉化為電信號。經常用的是紫外、熒光這類光學檢測器,也可以使用質譜檢測器。
光學檢測器的好處是不破壞樣品,也就是說,從一個檢測器出來之后樣品可以完好無損的進入下一種檢測器,比如先接紫外檢測器,再接質譜檢測器,就可以同時獲得光譜和質譜的信息。
所有的信息終被色譜數據處理系統,也就是CDS記錄和收集。CDS系統不僅收集數據還負責控制整個采集和分析的過程。

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